Question

12．我國科學家利用農(nóng)桿菌介導法，將含高賴氨酸蛋白基因（sb401）的表達載體導入玉米細胞，最終培育出“轉高賴氨酸蛋白基因（sb401）玉米”．結合圖示回答下列問題：

（1）sb401基因可以通過PCR技術在短時間內(nèi)大量擴增，該過程為：目的基因DNA受熱后解鏈，引物與單鏈相應互補序列結合，然后在耐熱的DNA聚合酶（或Taq酶）作用下進行延伸，如此重復循環(huán)多次．構建基因表達載體時，為了便于sb401基因與Ti質粒連接，應怎樣處理含該基因的DNA分子和質粒？用同一種限制酶同時切割含該基因的DNA分子和質粒．
（2）③過程為重組質粒導入農(nóng)桿菌的過程，常用常用鈣離子（或氯化鈣）溶液處理農(nóng)桿菌，使其轉化為感受態(tài)．⑥過程得以實現(xiàn)，與Ti質粒上的標記基因密切相關．
（3）目的基因能否在玉米植株中維持和表達其遺傳特性的關鍵是目的基因是否插入受體細胞的染色體DNA分子上．這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是DNA分子雜交技術．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中①表示目的基因的獲取，②表示基因表達載體的構建過程，③④表示采用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞；⑤表示脫分化過程；⑥表示篩選；⑦表示植物組織培養(yǎng)過程．

解答 解：（1）PCR技術可在短時間內(nèi)大量擴增目的基因；PCR擴增目的基因的過程為：目的基因DNA受熱后解鏈，引物與單鏈相應互補序列結合，然后在耐熱的DNA聚合酶（或Taq酶）作用下進行延伸，如此重復循環(huán)多次．構建基因表達載體時，需用同一種限制酶同時切割含該基因的DNA分子和質粒，以產(chǎn)生相同的黏性末端，這樣便于sb401基因與Ti質粒連接．
（2）將目的基因導入微生物細胞常用感受態(tài)轉化法，即用鈣離子（或氯化鈣） 溶液處理農(nóng)桿菌，使其轉化為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．⑥為篩選過程，該過程的實現(xiàn)與Ti質粒上的標記基因密切相關．
（3）目的基因能否在玉米植株中維持和表達其遺傳特性的關鍵是目的基因是否插入受體細胞的染色體DNA分子上．檢測目的基因是否導入受體細胞應該用DNA分子雜交技術．
故答案為：
（1）PCR技術    DNA聚合酶（或Taq酶）      用同一種限制酶同時切割含該基因的DNA分子和質粒
（2）常用鈣離子（或氯化鈣）      感受態(tài)     標記基因   
（3）目的基因是否插入受體細胞的染色體DNA分子上       DNA分子雜交技術

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．