Question

16．加利福尼亞大學的一組科學家通過基因工程技術成功地將螢火蟲的熒光素酶基因導入到大腸桿菌體內．
（1）在基因工程中，獲得目的基因通常有兩種途徑，在此基因工程中，獲得目的基因最可能的途徑是人工合成法，在此過程中需要使用DNA聚合酶和逆（反）轉錄酶．
（2）將目的基因導入大腸桿菌需要運載體的幫助．作為運載體需具備的條件有ABD．
A．能夠在宿主細胞內復制并穩(wěn)定保存
B．具有特定的限制酶切點
C．具有與目的基因相同的堿基片斷
D．具有某些標記基因
（3）培育能發(fā)熒光的植物是生物工程學家的美好愿望之一．如果利用基因工程技術將熒光素酶基因成功導入植物細胞，并能夠表達，請問如何才能培育成能發(fā)熒光的植物幼苗？利用組織培養(yǎng)技術簡述培育過程．先通過脫分化，得到愈傷組織，再通過再分化誘導生根生芽，得到植物苗．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
3、將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲得真核生物的目的基因最好采用人工合成法，即以mRNA為模板逆轉錄形成DNA，該過程需要DNA聚合酶和逆轉錄酶．
（2）作為基因工程的運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點； ②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細胞中穩(wěn)定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．故選：ABD．
（3）將轉基因植物細胞培育成轉基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術，其過程為：先通過脫分化，得到愈傷組織，再通過再分化誘導生根生芽，得到植物苗．
故答案為：
（1）人工合成法      DNA聚合酶     逆（反）轉錄
（2）ABD
（3）利用組織培養(yǎng)技術      先通過脫分化，得到愈傷組織，再通過再分化誘導生根生芽，得到植物苗

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理，掌握基因工程的工具及作用以及基因工程的具體操作步驟，能結合所學的知識轉答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．