Question

4．目前栽培的主要香蕉品種是三倍體，不結(jié)種子，因此無性繁殖成了主要種植方式．香蕉生產(chǎn)最容易遭受香蕉束頂病毒（BBTV）侵染，影響了全世界許多地區(qū)的香蕉產(chǎn)業(yè)．為提高其產(chǎn)量，某生物小組利用基因工程技術(shù)培育抗BBTV香蕉．
（1）闡述三倍體香蕉不結(jié)種子的原因減數(shù)分裂過程中發(fā)生聯(lián)會紊亂，不能形成正常生殖細胞．
（2）為獲取抗BBTV基因，可從含有該抗病基因的細胞中提取對應RNA，構(gòu)建cDNA文庫從而獲得目的基因．在獲得抗病基因后可通過RCR技術(shù)技術(shù)短時間大量擴增，該技術(shù)需要Taq酶．
（3）培育抗BBTV香蕉的核心是構(gòu)建基因表達載體，構(gòu)建好的基因表達載體必須有標記基因，標記基因的作用是為了鑒別受體細胞是否含有目的基因從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（4）將抗BBTV基因?qū)�入香蕉植物細胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（5）在抗BBTV香蕉培育過程中，用放射性同位素標記的抗BBTV基因作探針進行分子雜交檢測是否轉(zhuǎn)錄，用用香蕉束頂病毒（BBTV）侵染香蕉植株方法從個體水平鑒定香蕉植株的抗病性．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)：
（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）原理：DNA復制．
（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
（4）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
3、目的基因分子水平上的檢測：
①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．

解答 解：（1）由于三倍體植株體內(nèi)細胞減數(shù)分裂過程中發(fā)生聯(lián)會紊亂，不能形成正常生殖細胞，所以三倍體香蕉不結(jié)種子．
（2）為獲取抗BBTV基因，可從含有該抗病基因的細胞中提取對應RNA，構(gòu)建cDNA文庫從而獲得目的基因．在獲得抗病基因后可通過RCR技術(shù)技術(shù)短時間大量擴增，該技術(shù)需要Taq酶．
（3）培育抗BBTV香蕉的核心是構(gòu)建基因表達載體，構(gòu)建好的基因表達載體必須有標記基因，標記基因的作用是為了鑒別受體細胞是否含有目的基因從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（4）將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，將抗BBTV基因?qū)�入香蕉植物細胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（5）在抗BBTV香蕉培育過程中，用放射性同位素標記的抗BBTV基因作探針進行分子雜交檢測是否轉(zhuǎn)錄，用用香蕉束頂病毒侵染香蕉植株方法從個體水平鑒定香蕉植株的抗病性．
故答案為：
（1）減數(shù)分裂過程中發(fā)生聯(lián)會紊亂，不能形成正常生殖細胞
（2）cDNA       RCR技術(shù)     Taq
（3）鑒別受體細胞是否含有目的基因從而將含有目的基因的細胞篩選出來
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（2分）
（5）抗BBTV基因（目的基因）    用香蕉束頂病毒（BBTV ）侵染香蕉植株

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查學生的識秘能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力，屬于考綱中識記、理解層次的要求．