Question

【題目】紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2和CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

（1）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，加入檸檬酸鈉的目的是_____________ 。洗滌紅細(xì)胞時(shí)要用______（填溶液）反復(fù)洗滌、離心。要讓紅細(xì)胞破裂，釋放血紅蛋白時(shí)要加入_________。

（2）得到的血紅蛋白溶液裝入透析袋中透析，即血紅蛋白的粗分離，目的是除去_______。

（3）然后通過(guò)_____（填方法）將樣品進(jìn)一步純化，最后進(jìn)行純度鑒定，使用最多的是______（填方法）。

Answer 1

【答案】防止血液凝固 生理鹽水蒸餾水和甲苯去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)凝膠色譜法SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

【解析】

本題是對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的考查，回憶血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟，然后結(jié)合題干信息進(jìn)行解答。血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。

（1）血紅蛋白的提取和分離一般分為4步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。采取血液時(shí)要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固。樣品處理又包括紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析4步。洗滌紅細(xì)胞時(shí)要用生理鹽水反復(fù)洗滌、離心。要讓紅細(xì)胞破裂，釋放血紅蛋白時(shí)要加入蒸餾水和甲苯。

（2）透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)，透析的原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)。

（3）樣品的純化是通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。