Question

7．表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）在某些癌細(xì)胞表面明顯增多，針對(duì)EGFR的靶向治療越來越受到研究者的關(guān)注．
（1）研究者提取了癌細(xì)胞表面的EGFR，并注射到小鼠體內(nèi)．一段時(shí)間后，取小鼠的脾臟組織，剪碎后用胰蛋白酶使其分散成單個(gè)細(xì)胞．將得到的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，依次通過選擇培養(yǎng)基篩選和抗體陽性（或“抗原-抗體雜交”）檢測(cè)，篩選得到所需的雜交瘤細(xì)胞，并從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲得待測(cè)單克隆抗體．
（2）研究者將待測(cè)單克隆抗體作為抗原注射到異種動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行免疫，制備出抗EGFR單克隆抗體的抗體，然后將辣根過氧化物酶與該抗體結(jié)合，制備出酶標(biāo)記抗體．將EGFR結(jié)合到固相載體上，加入待測(cè)的單克隆抗體，再將酶標(biāo)記抗體加入反應(yīng)體系．然后向反應(yīng)體系中加入白色底物（可被辣根過氧化物酶催化形成藍(lán)色產(chǎn)物），反應(yīng)體系中藍(lán)色的深淺可以反映出待測(cè)單克隆抗體的含量．
（3）研究者分析所制備單克隆抗體的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)新的氨基酸序列，通過分子生物學(xué)的手段對(duì)控制合成該抗體的基因進(jìn)行修飾改造，從而解決鼠源抗體在人體內(nèi)的免疫排斥問題．研究者要利用大腸桿菌來表達(dá)新的單克隆抗體，降低生產(chǎn)成本，還需要解決抗體在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)翻譯后無法正確加工的問題．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
2、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．
3、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．

解答 解：（1）取小鼠的脾臟組織，剪碎后用胰蛋白酶使其分散成單個(gè)細(xì)胞．將得到的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤 細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，依次通過選擇培養(yǎng)基篩選和抗體陽性檢測(cè)，篩選得到所需的雜交瘤細(xì)胞，并從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲得待測(cè)單克隆抗體．
（2）研究者將待測(cè)單克隆抗體作為抗原注射到異種動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行免疫，制備出抗EGFR單克隆抗體，然后將辣根過氧化物酶與該抗體結(jié)合，制備出酶標(biāo)記抗體．將EGFR結(jié)合到固相載體上，加入待測(cè)的單克隆抗體，再將酶標(biāo)記抗體加入反應(yīng)體系．然后向反應(yīng)體系中加入白色底物（可被辣根過氧化物酶催化形成藍(lán)色產(chǎn)物），反應(yīng)體系中藍(lán)色的深淺可以反映出待測(cè)單克隆抗體的含量．
（3）研究者分析所制備單克隆抗體的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)新的氨基酸序列，通過分子生物學(xué)的手段對(duì)控制合成該抗體的基因進(jìn)行修飾改造，從而解決鼠源抗體在人體內(nèi)的免疫排斥問題．研究者要利用大腸桿菌來表達(dá)新的單克隆抗體，降低生產(chǎn)成本，還需要解決抗體在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)翻譯后無法正確加工的問題．
故答案為：
（1）胰蛋白酶     骨髓瘤     抗體陽性（或“抗原-抗體雜交”）
（2）抗EGFR單克隆抗體      EGFR     藍(lán)色的深淺
（3）基因     正確加工

點(diǎn)評(píng) 本題考查單克隆抗體的制備過程，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．