Question

【題目】狂犬病是一種死亡率非常高的傳染病，傳統(tǒng)抗狂犬病毒的抗體產(chǎn)址低、效應(yīng)低。研究發(fā)現(xiàn)，將人源抗狂犬病毒的抗體基因構(gòu)建的目的基因表達載體導(dǎo)人煙草細胞中，產(chǎn)生的煙草蛋白可中和99%的狂犬病毒。回答下列問題:

(1)人源抗狂犬病毒抗體編碼基因的偏好性改造:在不改變編碼_________序列的前提下，對人源抗狂犬病毒抗體基因進行修飾，使其編碼基因具有表達________的偏好性。

(2)構(gòu)建基因表達載體之前，為了便于__________的識別和結(jié)合，目的基因需融合花椰菜花葉病毒的啟動子；構(gòu)建目的基因表達載體時，為了防止_____。可用不同的限制酶分別處理目的基因和載體。常采用_______法將目的基因表達載體導(dǎo)人煙草細胞中。

(3)該種抗狂犬病毒的抗體制備方法中，煙草扮演的角色是______，該制備方法的優(yōu)點有______________。

Answer 1

【答案】氨基酸 煙草蛋白 RNA聚合酶 載體和目的基因黏性末端自身環(huán)化現(xiàn)象 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 生物反應(yīng)器 產(chǎn)生的抗體具有高效性、產(chǎn)量高

【解析】

真核細胞中的基因編碼區(qū)為內(nèi)含子和外顯子，其中成熟mRNA是以外顯子為轉(zhuǎn)錄模板形成的，在基因改造中不應(yīng)該改變外顯子，從而使目的基因表達。

（1）人源抗狂犬病毒抗體編碼基因的偏好性改造:在不改變外顯子即編碼氨基酸序列的前提下，對人源抗狂犬病毒抗體基因進行修飾，使其編碼基因具有表達煙草蛋白的偏好性，因為煙草蛋白可中和99%的狂犬病毒。

（2）啟動子位于基因的非編碼區(qū)，是RNA聚合酶識別和結(jié)合位點，構(gòu)建基因表達載體之前，為了便于RNA聚合酶的識別和結(jié)合，目的基因需融合花椰菜花葉病毒的啟動子；構(gòu)建目的基因表達載體時，為了防止載體和目的基因黏性末端自身環(huán)化現(xiàn)象。可用不同的限制酶分別處理目的基因和載體。常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因表達載體導(dǎo)人煙草細胞中。

（3）該種抗狂犬病毒的抗體制備方法即將人源抗狂犬病毒的抗體基因構(gòu)建的目的基因表達載體導(dǎo)人煙草細胞中，獲得抗狂犬病毒的抗體，煙草扮演的角色是生物反應(yīng)器，該制備方法的優(yōu)點有產(chǎn)生的抗體具有高效性、產(chǎn)量高。