Question

（14分）下面是煙草葉片原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)的流程圖：

請(qǐng)回答：

（1）酶解時(shí)，在纖維素酶和果膠酶的混合液中，還需添加       來提高混合液的滲透壓，以利于獲得完整的原生質(zhì)體。

（2）獲得原生質(zhì)體后，可用           方法檢測(cè)原生質(zhì)體是否存活。然后將原生質(zhì)體制成懸浮液，滴加在            上，用顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)。要判定原生質(zhì)體是否已形成細(xì)胞壁，可用       方法鑒別。

（3）欲通過原生質(zhì)體培養(yǎng)得到愈傷組織，從培養(yǎng)基的成分考慮，配制培養(yǎng)基時(shí)需要注意的主要方面有哪些？

 

Answer 1

【答案】

（14分）（1）甘露醇（2分）

（2）紅墨水染色    血細(xì)胞計(jì)數(shù)板    質(zhì)壁分離（每空2分）

（3）營養(yǎng)物質(zhì)的適當(dāng)配比（3分）和植物生長調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比（3分）

【解析】

試題分析：⑴在獲得植物原生質(zhì)體時(shí)，需在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液環(huán)境（較高滲透壓）下用纖維素酶和果膠酶混合液處理實(shí)驗(yàn)材料，將細(xì)胞壁消化除去，獲得球形的原生質(zhì)體。

⑵獲得原生體后可用紅墨水染色法檢測(cè)，因?yàn)樯�活狀態(tài)的原生質(zhì)體細(xì)胞膜具有選擇透過性，原生質(zhì)體不會(huì)被染上顏色，但如果原生質(zhì)體死亡，由膜的選擇透過性喪失，原生質(zhì)體會(huì)被染成紅色；對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行顯微計(jì)數(shù)，必須將原生質(zhì)體制成的懸浮液滴加在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上；可用質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)來檢測(cè)原生質(zhì)體是否已形成細(xì)胞壁。

⑶要將原生質(zhì)體培養(yǎng)成愈傷組織，配制培養(yǎng)基時(shí)需要注意營養(yǎng)物質(zhì)的適當(dāng)配比和植物生長調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比。

考點(diǎn)：本題考查原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。