Question

4．如圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程，請回答：

（1）過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是防止目的基因環(huán)化，此外還要用到DNA連接酶酶．
（2）過程②中首先需要用Ca²⁺處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化．
（3）與植物原生質(zhì)體融合相比，過程④特有的方法是用滅活的病毒處理．通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是防止培養(yǎng)過程中的污染．選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是（是、不是）單克隆抗體．
（4）圖示過程應(yīng)用的生物技術(shù)有基因工程 動物細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞融合（至少答出三種）．

Answer 1

分析 制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程，①是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③過程表示給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產(chǎn)生特定B淋巴細(xì)胞，④過程是動物細(xì)胞融合過程，據(jù)此答題即可．

解答 解：（1）過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割可以使目的基因的兩端獲得不同的粘性末端，所以這樣處理的優(yōu)點(diǎn)是防止目的基因環(huán)化，此外目的基因與運(yùn)載體結(jié)合還需DNA連接酶．
（2）過程②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，此過程首先需要用Ca²⁺處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化．
（3）與植物原生質(zhì)體融合相比遠(yuǎn)離基本相同，植物原生質(zhì)體融合常用物理方法和化學(xué)方法，動物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇和米阿娥活的病毒及電激，所以過程④特有的方法是用滅活的病毒處理．通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是防止培養(yǎng)過程中的污染．選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)過多次篩選才可以獲得．所以選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體．
（4）圖示過程應(yīng)用的生物技術(shù)有：①是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③過程表示給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產(chǎn)生特定B淋巴細(xì)胞，④過程是動物細(xì)胞融合過程．
故答案為：（1）防止目的基因環(huán)化　　　DNA連接酶
（2）Ca²⁺轉(zhuǎn)化
（3）滅活的病毒　　　防止培養(yǎng)過程中的污染　　　不是
（4）基因工程 動物細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞融合

點(diǎn)評 本題考查基因工程和細(xì)胞工程，并能運(yùn)用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識解決相關(guān)的生物學(xué)問題．