Question

【題目】研究者從某植物中克隆出花色基因C （圖1），擬將其與質粒（圖2）重組，再借助農桿菌導入牡丹中增加牡丹的花色類型。下列操作與實驗目的不符的是:

A. 用限制性核酸內切酶EcoRⅠ和DNA連接酶構建重組質粒

B. 用含C基因的農桿菌侵染牡丹的愈傷組織，將C基因導入細胞

C. 在培養(yǎng)基中添加潮霉素，可以提取出潮霉素抗性基因

D. 用分子雜交方法檢測C基因是否整合到牡丹染色體上

Answer 1

【答案】C

【解析】

基因工程的基本操作程序：

1、目的基因的獲取。

2、基因表達載體的構建。

3、將目的基因導入受體細胞。

4、目的基因的檢測和表達。

A、由題可知，目的基因兩端具有限制性核酸內切酶的酶切位點，則應用限制性核酸內切酶切開質粒，然后用DNA連接酶催化目的基因和切開后的質粒形成磷酸二酯鍵，得到重組質粒，故A項操作與實驗相符。

B、由于農桿菌轉化法適用于牡丹這種雙子葉植物，當植物體受到損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的酚類物質，吸引農桿菌移向這些細胞，這時農桿菌中的質粒會轉移進受體細胞，用含C基因的農桿菌侵染牡丹愈傷組織，可以將C基因導入細胞，故B項操作與實驗相符。

C、由題可知，質粒中添加的標記基因是潮霉素抗性基因，則在培養(yǎng)基中添加潮霉素以篩選出被轉化的細胞，不是提取出潮霉素抗性基因，故C項操作與實驗不符。

D、具有互補堿基序列的DNA分子，可以通過堿基對之間形成氫鍵，形成穩(wěn)定的雙鏈區(qū)。根據這一特性，可以單鏈的目的基因DNA片段用同位素、熒光分子等標記后與被檢測的DNA的同源互補序列雜交，從而檢測目的基因是否導入了牡丹染色體上，故D項操作與實驗相符。

故選C。