Question

科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療．其技術(shù)流程如圖，請回答相關(guān)問題：

（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過

 

技術(shù)獲得重組細(xì)胞，接受細(xì)胞核的去核卵母細(xì)胞應(yīng)該處于

 

時(shí)期．
（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其

 

分離出ES細(xì)胞．步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的

 

．構(gòu)建之前可以利用

 

技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增．
（3）將基因?qū)�入ES細(xì)胞常用的方法是

 

．體外誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同方向分化是利用了ES細(xì)胞的

 

．
（4）為檢測干擾素基因的表達(dá)情況，可采用

 

方法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功表達(dá)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用

專題：

分析：分析題圖：圖示是利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程，其中①表示獲得重組胚胎的過程；②表示早期胚胎培養(yǎng)過程；③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．

解答： 解：（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞，接受細(xì)胞核的去核卵母細(xì)胞應(yīng)該處于MⅡ期．
（2）ES細(xì)胞可以從囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離出來．將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞前，需要構(gòu)建含有目的基因（干擾素基因）的表達(dá)載體．PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因．
（3）將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法．體外誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同方向分化是利用了ES細(xì)胞的全能性．
（4）為檢測目的基因的表達(dá)情況，可采用抗體-抗原雜交技術(shù)，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功表達(dá)．
故答案為：
（1）核移植     MⅡ
（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)      表達(dá)載體    PCR
（3）顯微注射     全能性
（4）抗體-抗原雜交

點(diǎn)評：本題結(jié)合利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程圖，綜合考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記細(xì)胞工程的操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)；識記核移植技術(shù)的過程及應(yīng)用；識記胚胎干細(xì)胞的來源及特點(diǎn)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．