復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至40～60 ℃，可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。PCR的結(jié)果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結(jié)合，原因不包括(　　)

A．由于模板DNA比引物復(fù)雜得多

B．引物和模板之間的碰撞結(jié)合機會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補鏈之間的碰撞

C．加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少

D．模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合

 

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源：2011-2012學(xué)年安徽宿松復(fù)興中學(xué)高二下學(xué)期第三次月考生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

（10分）圓褐固氮菌是自生固氮菌，為經(jīng)濟有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量，人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進行，PCR技術(shù)有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時代，從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。
（1）某同學(xué)在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起，已知青霉素會影響固氮菌的生長繁殖，但不影響真菌的生長繁殖。請?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實驗步驟：
①分別配置               的培養(yǎng)基和            的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標(biāo)上A、a、B、b備用；
②分別向A、B培養(yǎng)基接種            ；
③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d；
④從A、B培養(yǎng)基上生長的      中挑取生長良好的菌株，分別接種到       中；
⑤                                 。
（2）用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因，然后進行PCR擴增。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。

反應(yīng)條件
 
溫度
時間
變 性
95℃
30s
復(fù) 性
55℃
30s
延 伸
72℃
1min
30個循環(huán)后
適宜
5-10min
保 溫
4℃
2h
 
PCR反應(yīng)體系
50ul
緩沖液
5ul
脫氧核苷酸
1ul
引物A      
0.5ul
引物B      
0.5ul
DNA聚合酶   
0.5U
模板DNA     
1-2ul
加去離子水補足至50 ul
①從上表中可得出，PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較，主要區(qū)別之一是              。
此外，從反應(yīng)條件看，所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有__________的特點。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________          ________________。

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科目：高中生物 來源：2013屆安徽宿松復(fù)興中學(xué)高二下學(xué)期第三次月考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

（10分）圓褐固氮菌是自生固氮菌，為經(jīng)濟有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量，人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進行，PCR技術(shù)有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時代，從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。

（1）某同學(xué)在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起，已知青霉素會影響固氮菌的生長繁殖，但不影響真菌的生長繁殖。請?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實驗步驟：

①分別配置                的培養(yǎng)基和             的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標(biāo)上A、a、B、b備用；

②分別向A、B培養(yǎng)基接種             ；

③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d；

④從A、B培養(yǎng)基上生長的       中挑取生長良好的菌株，分別接種到        中；

⑤                                  。

（2）用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因，然后進行PCR擴增。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。

反應(yīng)條件

 

溫度

時間

變  性

95℃

30s

復(fù)  性

55℃

30s

延  伸

72℃

1min

30個循環(huán)后

適宜

5-10min

保  溫

4℃

2h

 

PCR反應(yīng)體系

50ul

緩沖液

5ul

脫氧核苷酸

1ul

引物A      

0.5ul

引物B      

0.5ul

DNA聚合酶   

0.5U

模板DNA     

1-2ul

加去離子水補足至50 ul

①從上表中可得出，PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較，主要區(qū)別之一是               。

此外，從反應(yīng)條件看，所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有__________的特點。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________           ________________。

 

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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

圓褐固氮菌是自生固氮菌，為經(jīng)濟有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量，人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進行，PCR技術(shù)有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時代，從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。

（1）某同學(xué)在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起，已知青霉素會影響固氮菌的生長繁殖，但不影響真菌的生長繁殖。請?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實驗步驟：

①分別配置                的培養(yǎng)基和             的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標(biāo)上A、a、B、b備用；

②分別向A、B培養(yǎng)基接種             ；

③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d；

④從A、B培養(yǎng)基上生長的       中挑取生長良好的菌株，分別接種到        中；

⑤                                  。

（2）用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因，然后進行PCR擴增。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。

PCR反應(yīng)體系

50ul

緩沖液

5ul

脫氧核苷酸

1ul

引物A      

0.5ul

引物B      

0.5ul

DNA聚合酶   

0.5U

模板DNA     

1-2ul

加去離子水補足至50 ul

反應(yīng)條件

溫度

時間

變  性

95℃

30s

復(fù)  性

55℃

30s

延  伸

72℃

1min

30個循環(huán)后

適宜

5-10min

保  溫

4℃

2h

①從上表中可得出，PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較，主要區(qū)別之一是               。

此外，從反應(yīng)條件看，所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有__________的特點。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________           ________________。

②下圖為第1輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴增的產(chǎn)物。

（3）在對固氮基因產(chǎn)物的生產(chǎn)研究中，需要從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)。下圖表示蛋白質(zhì)提取和分離實驗涉及的相關(guān)原理。

①圖甲表示相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠色譜法分離的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，原因是                            。

②圖乙所示實驗?zāi)M電泳現(xiàn)象，U型管左側(cè)的顏色逐漸變深，原因是            。

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科目：高中生物 來源： 題型：

復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至40～60 ℃，可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。PCR的結(jié)果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結(jié)合，原因不包括(　　)

A．由于模板DNA比引物復(fù)雜得多

B．引物和模板之間的碰撞結(jié)合機會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補鏈之間的碰撞

C．加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少

D．模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合

 

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