Question

PCR技術(shù)是把一DNA片段在體外酶的作用下，合成許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地?cái)U(kuò)增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本過(guò)程如下圖所示

圖中表示每次擴(kuò)增過(guò)程中需要的引物（加入足夠多）。每個(gè)引物含20個(gè)核苷酸，并分別與DNA片段兩端堿基互補(bǔ)，其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈，還作為子鏈的一部分，不會(huì)從模板鏈上脫落下來(lái)，
（1）PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)的           過(guò)程。
（2）PCR擴(kuò)增過(guò)程中需要對(duì)DNA片段進(jìn)行高溫處理，其目的是                ，此過(guò)程在生物體內(nèi)需          酶的參與，作用部位是DNA的     鍵。
（3）據(jù)圖分析，擴(kuò)增過(guò)程中需要的引物有    種，其實(shí)質(zhì)是         ，假如引物都用³H標(biāo)記，從理論上計(jì)算，所得DNA分子中含有³H標(biāo)記的占           。
（4）假定DNA片段含200對(duì)脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，從理論上計(jì)算還需要提供      個(gè)游離脫氧核苷酸。

Answer 1

（1）DNA復(fù)制
（2）使DNA的兩條鏈彼此分開(kāi)（或解旋）  解旋  氫
（3）兩 單鏈DNA   100％（2分）
（4）2520（2分）

解析試題分析：PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程。高溫處理使DNA的兩條鏈彼此分開(kāi)，此過(guò)程在生物體內(nèi)需解旋酶的參與，作用部位是DNA的氫鍵。據(jù)圖分析，擴(kuò)增過(guò)程中從兩條模板鏈反向進(jìn)行所以需要的引物有兩種，引物就是與母鏈互補(bǔ)的一段單鏈DNA，由于半保留式復(fù)制，所得DNA分子中含有³H標(biāo)記的占100％。200對(duì)脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，從理論上計(jì)算還需要提供游離脫氧核苷酸200×2×2³=3200，減去模板400.減去引物40×7=280，所以一共需要2520個(gè)。
考點(diǎn)：PCR技術(shù)
點(diǎn)評(píng)：本題考查了學(xué)生的識(shí)圖分析計(jì)算能力，難度適中，解題的關(guān)鍵是會(huì)計(jì)算考慮引物的復(fù)制過(guò)程。