Question

7．尿素是一種高濃度氮肥長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細(xì)菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	l.0g	10.0g	l.0g	15.0g

（1）根鋸培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌不能 （能/不能），原因是培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源．不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物．
（2）要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目就能大約推測出樣品中活菌數(shù)．
（3）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是微生物培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基，其中的蛋白胨為微生物的生長提供了碳源、氮源、維生素（特殊營養(yǎng)物質(zhì)）  等營養(yǎng)物質(zhì)，接種前要對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌．在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進(jìn)行．
（4）一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高，應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？對菌液進(jìn)行梯度稀釋（加大稀釋倍數(shù)）．

Answer 1

分析 1、尿素分解菌體內(nèi)的脲酶能夠?qū)⑼寥乐械哪蛩胤纸鉃榘辈拍鼙恢参镂�收利用，尿素分解菌屬于�?xì)菌，篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．
2、微生物篩選與培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答 解：（1）據(jù)題表分析，表中的配方不能篩選分離出尿素分解菌，原因是沒有使用選擇培養(yǎng)基，即培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物．
（2）稀釋涂布平板法接種常用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目可以推測出樣品中活菌數(shù)．
（3）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是微生物培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基，其中的蛋白胨為微生物的生長提供了碳源、氮源、維生素（特殊營養(yǎng)物質(zhì)）等營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進(jìn)行．
對微生物進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)可采用稀釋涂布平板法完成
（4）一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高，為避免此種現(xiàn)象，應(yīng)對菌液進(jìn)行梯度稀釋（加大稀釋倍數(shù)）．
對菌液進(jìn)行梯度稀釋用固定化酶技術(shù)，可以使脲酶反復(fù)使用，提高了酶的利用率．
故答案為：
（1）不能    培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源
（2）稀釋涂布平板 菌落數(shù)目
（3）碳源、氮源、維生素（特殊營養(yǎng)物質(zhì)）      高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌    無菌
（4）菌液濃度過高       對菌液進(jìn)行梯度稀釋（加大稀釋倍數(shù)）

點(diǎn)評 本題以培養(yǎng)基成分的表格為載體，考查微生物的篩選與培養(yǎng)的知識(shí)，考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、無菌技術(shù)中的滅菌方法和微生物培養(yǎng)的條件，掌握培養(yǎng)基的種類及功能和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則是解題的關(guān)鍵．