Question

圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列．現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C^↓CGG、G^↓GATCC、^↓GATC、CCC^↓GGG．下列分析中正確的是（　　）

• A、若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產(chǎn)生2個(gè)粘性末端
• B、若單純?yōu)榱双@取目的基因，也可以選擇種限制酶MspⅠ
• C、若需將目的基因D導(dǎo)入圖2中的質(zhì)粒，應(yīng)選擇的限制酶是BamHⅠ
• D、為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基上需添加抗生素A和抗生素B

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖1：圖中DNA片段含有2個(gè)限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割位點(diǎn)，也含有兩個(gè)限制酶BamHⅠ和MboⅠ切割位點(diǎn)．基因D兩側(cè)序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割．
分析圖2：質(zhì)粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割．用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A．

解答： 解：A、限制酶SmaⅠ的識別序列為CCC^↓GGG，用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產(chǎn)生2個(gè)平末端，而不是黏性末端，故A錯(cuò)誤；
B、限制酶MspⅠ的識別序列是C^↓CGG，在目的基因上，用該限制酶切割目的基因會(huì)破壞末端基因，所以為了獲取目的基因，不能選擇限制酶MspⅠ，而應(yīng)選擇限制酶BamHⅠ，故B錯(cuò)誤；
C、限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割會(huì)破壞目的基因，用限制酶MboⅠ切割會(huì)將質(zhì)粒上的兩個(gè)標(biāo)記基因都破壞，但在目的基因兩側(cè)和質(zhì)粒上都含有限制酶BamHⅠ的識別序列，所以將目的基因D導(dǎo)入圖2中的質(zhì)粒，應(yīng)選擇的限制酶是BamHⅠ，故C正確；
D、用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A，所以為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基上需分別添加抗生素B和抗生素A，故D錯(cuò)誤．

點(diǎn)評：本題考查基因工程操作的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點(diǎn)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力．