Question

【題目】某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣�；卮鹣铝袉栴}：

(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用________對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是___________________________。

(2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有________和__________。分離純化時應(yīng)挑選出________的菌落作為候選菌。

(3)乳酸菌在－20 ℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。

Answer 1

【答案】 無菌水 泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 鑒別乳酸菌 中和產(chǎn)生的乳酸(或酸) 具有透明圈 甘油

【解析】試題分析：泡菜制作主要利用了乳酸菌的作用，由于泡菜濾液中含有較多的乳酸菌，直接涂布很難獲得單菌落，因此涂布前應(yīng)進行梯度稀釋。微生物的長期保存，常采用甘油管藏的方法。

(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，這樣既可避免雜菌污染，又可將乳酸菌分散成單個細胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

(2)乳酸的積累影響乳酸菌的增殖，加入碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝(無氧呼吸)過程中產(chǎn)生的乳酸，另外，乳酸和碳酸鈣反應(yīng)，進而導(dǎo)致碳酸鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別和分離。

(3)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，裝入1 mL甘油后滅菌。將1 mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20 ℃的冷凍箱中保存。