Question

自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將它們分離提純，然后進(jìn)行數(shù)量的測定。下面是對大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn)，請回答有關(guān)問題。步驟如下：
A.制備稀釋倍數(shù)為10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶的系列稀釋液。
B.為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，你選用             (稀釋混合平板法、稀釋涂布平板法)接種樣品。
C.適宜溫度下培養(yǎng)。
結(jié)果分析：
（1）測定的大腸桿菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確可信的是(      )
A.一個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是23
B.兩個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是22和26，取平均值24
C.三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、5和52，取平均值26
D.四個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25
（2）一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為10⁵的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL)_____________________。
（3）用這種方法測定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量           （1分），因?yàn)開_______________                                                             。
（4）某同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了？        （1分），為什么？                             。

Answer 1

步驟B：稀釋混合平板法    結(jié)果分析：（1）D   （2）1.17×10⁸（3）多 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落（4）不能 因?yàn)椴荒芘懦�雜菌來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程 

解析試題分析：平板劃線分離法是指由接種環(huán)以無菌操作蘸取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。稀釋倒平板法又分為稀釋涂布平板法和稀釋混合平板法。稀釋涂布平板法就是將稀釋后的菌液分別涂布在固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)；稀釋混合平板法就是將不同濃度的稀釋液與已溶化并冷卻至45 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后，傾倒入滅過菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養(yǎng)一定時間后即可出現(xiàn)菌落。 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。隨后挑取該單個菌落，或重復(fù)以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。由于大腸桿菌屬于兼性厭氧菌，為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，最好選用稀釋混合平板法。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)計(jì)算的平板越多，其平均值越接近實(shí)際值。但是C選項(xiàng)中出現(xiàn)一個菌落數(shù)只有5的結(jié)果，不可信，因此答案選D。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝C/V×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表稀釋平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。用這種方法測定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多，因?yàn)楫?dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落。在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，其原因可能有多種，一是大腸桿菌被污染了，二是培養(yǎng)基被污染了，三是培養(yǎng)過程中被污染了。
考點(diǎn)：本題考查微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用。
點(diǎn)評：本題意在考查考生的識記能力和應(yīng)用能力，屬于中等難度題。