Question

19．組織型纖溶酶原激活劑（tPA）在人體纖溶和凝血的平衡調(diào)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用，現(xiàn)欲利用基因工程技術(shù)將tPA基因?qū)�入奶牛成纖維細(xì)胞中，并通過核移植技術(shù)獲得克隆轉(zhuǎn)基因奶牛，最后從奶牛乳汁中獲取組織型纖溶酶原激活劑．請(qǐng)回答：
（1）為獲得大量tPA基因，可將其連接到質(zhì)粒上，通過大腸桿菌培養(yǎng)擴(kuò)增．構(gòu)建重組DNA分子時(shí)，需要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，為了便于檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體成纖維細(xì)胞中，重組DNA分子上要有標(biāo)記基因．
（2）核移植時(shí)，需將成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移人去核卵細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞，部分原因是卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用．通過早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，將重組細(xì)胞培養(yǎng)成早期囊胚．將早期囊胚移植到代孕受體之前需要經(jīng)過同期發(fā)情處理，以便成功植人或著床．
（3）為了繁殖更多后代，可以通過胚胎分割技術(shù)，產(chǎn)生同卵多仔．下列關(guān)于該技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是D．
A．增加胚胎數(shù)量，快速繁殖 B．可以采用相關(guān)酶處理卵裂球
C．該技術(shù)涉及顯微操作技術(shù) D．同卵多仔的表現(xiàn)型一定相同．

Answer 1

分析 1、胚胎分割的主要儀器設(shè)備：實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀；胚胎分割的特點(diǎn)：來自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)．
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查．
3、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）為獲得大量tPA基因，可將其連接到質(zhì)粒上，通過大腸桿菌培養(yǎng)擴(kuò)增．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要限制酶切割運(yùn)載體和含有目的基因的外源DNA分子，其次要求DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA；為了便于檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體成纖維細(xì)胞中，重組DNA分子上要有標(biāo)記基因．
（2）核移植時(shí)，需將成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移人去核卵細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞，部分原因是卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用．通過早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，將重組細(xì)胞培養(yǎng)成早期囊胚．胚胎移植前，需要經(jīng)過同期發(fā)情處理，使供受體的生理狀態(tài)相同，以便成功植人或著床．
（3）A．胚胎分割技術(shù)能增加胚胎數(shù)量，快速繁殖，A正確；
B．不同階段的胚胎進(jìn)行胚胎分割時(shí)，可采用的方法有一定的差別，若胚胎處于卵裂期可以采用酶解法或機(jī)械法，若囊胚則只能運(yùn)用機(jī)械法分割，且要求等份分割，B正確；
C、胚胎分割技術(shù)涉及顯微操作技，C正確；
D．生物的性狀由基因型與環(huán)境共同決定，因此同卵多仔的基因型相同，但表現(xiàn)型一定相同，D錯(cuò)誤．
故選：D．
故答案為：
（1）質(zhì)粒       限制酶和DNA連接酶     標(biāo)記基因 
（2）細(xì)胞核      早期胚胎培養(yǎng)      同期發(fā)情 
（3）D

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記胚胎移植的基本程序及胚胎分割技術(shù)的注意事項(xiàng)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．