Question

苦馬豆素（SW）最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得，為了研究SW是否具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，許多學(xué)者做了大量研究，請(qǐng)根據(jù)以下實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程及研究結(jié)果回答問(wèn)題．
①取小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞
②制成單細(xì)胞懸液，接種于多孔板，加入等量培養(yǎng)液，每組設(shè)5個(gè)平行孔
③于37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)24h
④加入等量不同濃度SW溶液，于37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)
⑤分別在24h、48h、72h時(shí)吸取培養(yǎng)液，觀察結(jié)果，得到不同濃度SW對(duì)細(xì)胞存活率影響曲線（圖1）
⑥將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心，細(xì)胞染色，在熒光顯微鏡下觀察拍照，記錄正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞數(shù)目，并采用免疫熒光細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表達(dá)量狀況，匯總統(tǒng)計(jì)結(jié)果（表1）
（1）實(shí)驗(yàn)中首先將小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，于37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是

 

．
（2）實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組的處理方法應(yīng)為

 

，利用多孔板培養(yǎng)時(shí)，每組設(shè)置5個(gè)平行孔同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)，計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值是為了

 

．
（3）分析圖1中曲線可知，SW對(duì)肝癌Hepal-6細(xì)胞作用效果的特點(diǎn)是：

SW（μg/mL）	癌細(xì)胞數(shù)目	凋亡細(xì)胞數(shù)目	Bax蛋白	Bcl-2蛋白
2	+	++++	++++	+
1	++	+++	+++	++
0.5	+++	++	++	+++
0	++++	+	+	++++

表1培養(yǎng)48h細(xì)胞數(shù)目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)量情況（注：“+”的數(shù)量表示相對(duì)值的大�。�
①

 

；
②

 

．
（4）表1結(jié)果說(shuō)明SW可以誘發(fā)細(xì)胞

 

，從分子水平上分析，SW可以導(dǎo)致癌細(xì)胞內(nèi)

 

的合成量增加，該基因表達(dá)的過(guò)程可以表示為

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物體細(xì)胞克隆

專題：

分析：分析表格：隨著SW濃度的增加，癌變的細(xì)胞減少，凋亡的細(xì)胞增多，可以得出SW可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；同時(shí)，可以看出Bax蛋白隨著SW濃度增加而增加，Bcl-2蛋白著SW濃度增加而減少．
分析曲線圖：SW濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)；SW作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)．

解答： 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，制成單個(gè)細(xì)胞，防止接觸抑制，給予適宜的環(huán)境，使細(xì)胞克隆（細(xì)胞分裂、細(xì)胞增殖），為科研提供足夠的材料．
（2）空白對(duì)照，不加SW，多組測(cè)量為減小誤差使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可信．
（3）相同作用時(shí)間，不同SW濃度對(duì)小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制，且隨著SW濃度增加，抑制作用增強(qiáng)；同一SW濃度，不同作用時(shí)間對(duì)對(duì)小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制，且隨著SW作用時(shí)間增加，抑制作用增強(qiáng)．
（4）分析曲線圖可知：SW濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)；SW作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)．Bax基因表達(dá)的過(guò)程可以表示為Bax基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA，mRNA翻譯成Bax蛋白，如圖：．
故答案：（1）細(xì)胞克�。�細(xì)胞分裂、細(xì)胞增殖）
（2）不加SW藥物（或只加入等量的生理鹽水）  減小誤差使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可信
（3）①SW濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)
②SW作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)
（4）凋亡    Bax蛋白

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖表，考查動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆，意在考查考生具有對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步探究的能力，具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理．