某同學(xué)在做微生物實驗時,不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混合在一起。請你完成分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的實驗步驟,并回答有關(guān)問題:
⑴主要步驟:
①制備兩種培養(yǎng)基:一種是____培養(yǎng)基,另一種_____的培養(yǎng)基。分別分成兩份,依次標(biāo)上A,A/的B,B/,備用。
②分別向A、B培養(yǎng)基中接種______。
③接種后,放在恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。
④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種,接種到A/、B/培養(yǎng)基中。
⑤接種后,把A/、B/培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。
⑵回答問題:
在步驟①中,為保證無雜菌污染,實驗中應(yīng)采用的主人措施有__________、______________、_____________。
第④⑤兩個步驟的目的是_____________________。
科目:高中生物 來源: 題型:
某同學(xué)在做微生物實驗時,不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混在一起,請你設(shè)計實驗分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌。?
(1)實驗原理: 。?
(2)材料用具:配制培養(yǎng)基所需要的各種原料、無菌操作箱、接種環(huán)等。?
(3)簡述主要步驟:?
①制備兩種培養(yǎng)基,一種是 培養(yǎng)基;另一種是 培養(yǎng)基。分別分成兩份,依次標(biāo)上A、a、B、b備用。?
②分別向A、B培養(yǎng)基中接種混合菌。?
③接種后,放在恒溫箱中培養(yǎng)3~4 d。?
④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌,分別接種到a、b培養(yǎng)基中。?
⑤接種后,把a、b培養(yǎng)基再放入恒溫箱中培養(yǎng)3~4 d。?
(4)實驗結(jié)果:在a、b培養(yǎng)基上獲得的分別是 、 。?
(5)回答問題:?
步驟④、⑤的目的是 。?
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年安徽宿松復(fù)興中學(xué)高二下學(xué)期第三次月考生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
(10分)圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經(jīng)濟有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量,人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進(jìn)行,PCR技術(shù)有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時代,從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。
(1)某同學(xué)在做微生物實驗時,不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起,已知青霉素會影響固氮菌的生長繁殖,但不影響真菌的生長繁殖。請?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實驗步驟:
①分別配置 的培養(yǎng)基和 的培養(yǎng)基,分別分成兩份,依次標(biāo)上A、a、B、b備用;
②分別向A、B培養(yǎng)基接種 ;
③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d;
④從A、B培養(yǎng)基上生長的 中挑取生長良好的菌株,分別接種到 中;
⑤ 。
(2)用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因,然后進(jìn)行PCR擴增。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。
反應(yīng)條件 | ||
| 溫度 | 時間 |
變 性 | 95℃ | 30s |
復(fù) 性 | 55℃ | 30s |
延 伸 | 72℃ | 1min |
30個循環(huán)后 | 適宜 | 5-10min |
保 溫 | 4℃ | 2h |
PCR反應(yīng)體系 | 50ul |
緩沖液 | 5ul |
脫氧核苷酸 | 1ul |
引物A | 0.5ul |
引物B | 0.5ul |
DNA聚合酶 | 0.5U |
模板DNA | 1-2ul |
加去離子水補足至50 ul |
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科目:高中生物 來源:2013-2014學(xué)年湖北孝感高三第二次統(tǒng)一考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
某同學(xué)在做微生物實驗時,不小心把圓褐固氮菌(可利用空氣中N2合成含氮有機物)和酵母菌混合在一起,得到混合菌。請你完成得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的分離實驗
步驟,并回答有關(guān)問題:
(1)主要步驟:
①制備兩種培養(yǎng)基:一種是????????? 培養(yǎng)基,另一種是加????????? 的培養(yǎng)基。分別分成
兩份,依次標(biāo)上A,A′和B,B′,備用。
②分別向A、B培養(yǎng)基中接種????????????? 。
③接種后,放在恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。
④分別從A、B培養(yǎng)基生長良好的菌落中挑取菌種,按照A→A′,B→B′的方式進(jìn)行接種。
⑤接種后,把A′、B′培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。
(2)回答問題:
在步驟①中,為保證無雜菌污染,實驗中應(yīng)采用的主要措施有:對培養(yǎng)基進(jìn)行
;將???????????? 在酒精燈火焰上滅菌;接種過程在?????????????? 附近進(jìn)行。
第④⑤兩個步驟的目的是獲得????????????????????????????????????????????????? 。
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科目:高中生物 來源:上海市2010屆高三第二次聯(lián)考生物試卷 題型:綜合題
(9分)請回答下列有關(guān)微生物的問題。
(1)在微生物分離、鑒定實驗中,通常在配置固體培養(yǎng)基時需在培養(yǎng)基中加入 ___(物質(zhì))。
(2)采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時,為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長,需將培養(yǎng)皿 ____培養(yǎng)。
(3)下表為探究抗生素對微生物抑制作用的實驗處理。先將大腸桿菌接種于培養(yǎng)基上,然后將培養(yǎng)皿置于37℃條件下培養(yǎng)2~3天,觀察、測量并記錄 _______________情況。如果實驗所用抗生素的濃度關(guān)系為A< C < B,則編號1、2、3、4的抑菌效果從大到小依次為 __________________________________。
編號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
||
實驗處理 |
圓紙片浸在 |
|||||
濃度A抗生素 |
濃度B抗生素 |
濃度C抗生素 |
蒸餾水 |
|||
|
(4)現(xiàn)有5種酵母菌的營養(yǎng)缺陷型菌株1、2、3、4、5,它們不能合成生長所必需的物質(zhì)G,已知A、B、C、D、E都是合成G物質(zhì)的必需中間產(chǎn)物,但不知這些物質(zhì)合成的順序, 于是在培養(yǎng)基中分別加入這幾種物質(zhì)并分析了這幾種物質(zhì)對各種營養(yǎng)缺陷型菌株生長的影響結(jié)果如下表所示。
根據(jù)以上結(jié)果,推測這幾種物質(zhì)的合成順序應(yīng)是 。
(5)某同學(xué)在做微生物實驗時,不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起,請你幫助該同學(xué)完善實驗步驟,將自生固氮菌和酵母菌分離開來:
①制備兩種培養(yǎng)基,對兩種培養(yǎng)基的處理方式分別是:一種是 ,另一種是 ,將兩種培養(yǎng)基各自分成兩份,依次標(biāo)上A,a和B,b。
②分別向A、B培養(yǎng)基中接種 菌,適宜條件下培養(yǎng)3-4天。
③分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌并分別接種到a和b培養(yǎng)基中,適宜條件下培養(yǎng)3-4天。其目的是 。
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科目:高中生物 來源:2010-2011學(xué)年高考復(fù)習(xí)單元檢測:選修一生物技術(shù)實踐專題 題型:綜合題
某同學(xué)在做微生物實驗時,不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混在一起,請你設(shè)計實驗分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌。
(1)實驗原理:
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)材料用具:配制培養(yǎng)基所需要的各種原料、無菌操作箱、接種環(huán)等。
(3)簡述主要步驟:
①制備兩種培養(yǎng)基,一種是________培養(yǎng)基;另一種是________培養(yǎng)基。分別分成兩份,依次標(biāo)上A、a、B、b備用。
②分別向A、B培養(yǎng)基中接種混合菌。
③接種后,放在恒溫箱中培養(yǎng)3~4 d。
④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌,分別接種到a、b培養(yǎng)基中。
⑤接種后,把a、b培養(yǎng)基再放入恒溫箱中培養(yǎng)3~4 d。
(4)實驗結(jié)果:在a、b培養(yǎng)基上獲得的分別是________、________。
(5)回答問題:
步驟④、⑤的目的是
________________________________________________________________________。
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