Question

如圖2表示我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的具體培育過程．

請據(jù)圖回答下列問題：
（1）上述過程涉及的現(xiàn)代生物工程技術(shù)，屬于分子水平的是

 

，其核心步驟是

 

．
（2）構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖1中的

 

處，DNA連接酶作用于

 

處．（填“a”或“b”），b箭頭指的是

 

，PCR過程斷裂此鍵用

 

．
（3）若要獲得單個的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，需用

 

處理豬胚胎的部分組織．
（4）E過程中若要獲得大量的卵母細(xì)胞需用

 

激素處理成年母豬．
（5）H過程的名稱是

 

，所選擇的胚胎一般處于

 

期較合適．
（6）經(jīng)過培養(yǎng)得到早期胚胎后可以用胚胎分割技術(shù)以獲得更多基因型

 

相同/不相同）的轉(zhuǎn)基因克隆豬胚胎，且在進(jìn)行H過程之前，需要對代孕母豬進(jìn)行

 

處理，以給早期胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：分析圖解，可以看出該熒光克隆豬涉及了多項(xiàng)生物工程技術(shù)．首先導(dǎo)入目的基因的豬的成纖維細(xì)胞，要經(jīng)過動物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞與成年母豬的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞，重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成熒光克隆豬．該過程中利用基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)．

解答： 解：（1）圖中綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的形成過程運(yùn)用了基因工程、核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等現(xiàn)代生物工程技術(shù)，其中基因工程技術(shù)屬于分子水平，其核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．
（2）構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖1中的（磷酸二酯鍵）a處，DNA連接酶作用于（磷酸二酯鍵）a處，b箭頭指的是氫鍵，PCR過程利用高溫條件使氫鍵斷裂．
（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)前，先要用胰蛋白酶處理組織，使組織中的細(xì)胞分散開來．
（4）用促性腺激素處理母畜，可使其超數(shù)排卵，獲得大量的卵母細(xì)胞．
（5）H是胚胎移植過程，一般選擇處于桑椹胚或囊胚期的胚胎進(jìn)行移植．
（6）來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，所以將早期胚胎進(jìn)行胚胎分割后可以獲得更多基因型相同的轉(zhuǎn)基因克隆豬胚胎．進(jìn)行胚胎移植之前，需要對代孕母豬進(jìn)行同期發(fā)情處理，這樣可以給早期胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境，提供胚胎移植的成功率．
故答案為：
（1）基因工程      基因表達(dá)載體的構(gòu)建
（2）a       a        氫鍵         高溫
（3）胰蛋白酶
（4）促性腺
（5）胚胎移植     桑椹胚或囊胚
（6）相同         同期發(fā)情

點(diǎn)評：本題難度適中，屬于考綱中理解層次的要求，考查基因工程、胚胎工程和細(xì)胞工程等相關(guān)知識，該過程中利用基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，要求考生具有一定的識圖能力和理解能力．