Question

13．回答下列關(guān)于現(xiàn)代生物科技的問(wèn)題：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)為了將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，常用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理剪碎的組織塊，并用培養(yǎng)液將細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要通入5%的CO₂，其目的是維持培養(yǎng)基的pH，為了防止雜菌污染，通常要在培養(yǎng)基中添加抗生素．
（3）動(dòng)物細(xì)胞核移植時(shí)普遍使用的去核方法是顯微操作去核法；常選用處于MⅡ中期（減數(shù)第二次分裂中期）（時(shí)期）的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，主要是因?yàn)槁鸭?xì)胞大，易操作，含有促進(jìn)細(xì)胞全能性表達(dá)的相關(guān)物質(zhì)．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎經(jīng)過(guò)胚胎移植最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體．核移植得到的動(dòng)物稱(chēng)克隆動(dòng)物．該過(guò)程中采用顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中細(xì)胞核．
2、取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
3、培養(yǎng)條件：
（1）無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境：無(wú)菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．；無(wú)毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害．
（2）營(yíng)養(yǎng)：
成分：所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．
培養(yǎng)基類(lèi)型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類(lèi)和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．O₂：是細(xì)胞代謝所必需的  CO₂主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．

解答 解：（1）動(dòng)物組織培養(yǎng)需用胰蛋白酶將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，并用培養(yǎng)液將細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸浮液．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要通入5%的CO₂，其目的是維持培養(yǎng)基的pH，在培養(yǎng)基中添加抗生素，防止雜菌污染．
（3）體細(xì)胞核移植的過(guò)程中，去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核可采用顯微操作去核法．因?yàn)槁鸭?xì)胞大，易操作，含有促進(jìn)細(xì)胞全能性表達(dá)的相關(guān)物質(zhì)，因此常選用處于MⅡ中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞．
故答案為：
（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）   細(xì)胞懸液
（2）維持培養(yǎng)基的pH    抗生素
（3）顯微操作去核法   MⅡ中期（減數(shù)第二次分裂中期）      細(xì)胞全能性

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念、過(guò)程及采用的技術(shù)手段，明確克隆動(dòng)物的細(xì)胞核均來(lái)自供體的細(xì)胞核，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自受體細(xì)胞，另外關(guān)鍵是掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程和條件，再對(duì)選項(xiàng)作出準(zhǔn)確的判斷．