在利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過程中,不需要的條件是
A.引物
B.模板DNA
C.核糖核苷酸
D.熱穩(wěn)定DNA聚合酶
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科目:高中生物 來源:2012屆天津市天津一中高三入學(xué)摸底考試 生物試卷 題型:綜合題
請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問題:
(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如下圖所示)。 圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。
①?gòu)睦碚撋贤茰y(cè),第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為 。
②在第 輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。
(2)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理(如下圖),請(qǐng)分別說明理由。
①第1組:引物I和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效; ②第2組: 。
(3) PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶,下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能,這是因?yàn)?u> 。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒,得到的DNA片段長(zhǎng)度如下圖(1 kb
即1000個(gè)堿基對(duì)),請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點(diǎn)。
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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年江蘇省高三高考最后一卷生物試卷 題型:綜合題
ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制,需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過程如下:
第①步:用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。
第③步:將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質(zhì)粒2。
第④步:將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同,所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組,產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物,其作用是 。
(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經(jīng)過三個(gè)步驟,其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是 。
(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí),為保證成功率,往往使用 酶對(duì)基 因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開。
(4)質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,其化學(xué)本質(zhì)是 ,此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。
(5)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選,可用 制成探針,檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細(xì)胞篩選出來。
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年安徽省高三上學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
(10分)請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問題:
(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如下圖所示)。 圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。
①?gòu)睦碚撋贤茰y(cè),第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A,不含有引物B的DNA片段所占的比例為______。
②至少完成_____輪循環(huán),才能獲得兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。
(2)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的一組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)是不符合要求的(如下圖),請(qǐng)說明理由____________________________________________。
(3) PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶,下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的 功能,這是因?yàn)開_______________________________________。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒,得到的DNA片段長(zhǎng)度如下圖(1 kb
即1000個(gè)堿基對(duì)),請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點(diǎn)。
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科目:高中生物 來源:江蘇省期中題 題型:單選題
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