Question

用³²P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌，在理論上，上清液中不含放射性，下層沉淀物中具有很高的放射性，而實(shí)驗(yàn)的實(shí)際結(jié)果顯示：在離心的上清液中，也具有一定的放射性，而下層的放射性強(qiáng)度比理論值略低。

(1)在理論上，上清液放射性應(yīng)該為0，其原因是______________________________。

(2)由于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論數(shù)據(jù)之間有較大的誤差，請(qǐng)你對(duì)實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行誤差分析：

a．在實(shí)驗(yàn)中，從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)到用離心機(jī)分離，這一段時(shí)間如果過長(zhǎng)，會(huì)使上清液的放射性含量________，其原因是____________________________________________________________________。

b．在實(shí)驗(yàn)中，如果有一部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，是否有誤差的來源呢？________，請(qǐng)簡(jiǎn)述理由：

________________________________________________________________________。

(3)請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)方法，來大量制備用³²P標(biāo)記的噬菌體。

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Answer 1

(1)噬菌體已將含³²P的DNA全部注入到大腸桿菌內(nèi)

(2)升高　噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖后釋放出來，經(jīng)離心后分布于上清液中　有　沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)的噬菌體經(jīng)離心后分布于上清液，使上清液出現(xiàn)放射性

(3)先用³²P標(biāo)記大腸桿菌，再用未標(biāo)記的噬菌體去侵染被³²P標(biāo)記的大腸桿菌，可大量獲得被³²P標(biāo)記的噬菌體

 

(1)噬菌體侵染大腸桿菌時(shí)，只將其DNA注入，蛋白質(zhì)未進(jìn)入，由于P幾乎都在DNA中，因此從理論上分析，上清液中應(yīng)無³²P。(2)實(shí)驗(yàn)中，如果從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)到用離心機(jī)分離的時(shí)間過長(zhǎng)，就會(huì)有大腸桿菌裂解而釋放出子代噬菌體使上清液中放射性含量升高；如果有部分被標(biāo)記的噬菌體沒有侵染到大腸桿菌內(nèi)，離心后這部分噬菌體就分布在上清液中而使其帶有放射性。(3)噬菌體是專門寄生在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的，因此要制備大量的用³²P標(biāo)記的噬菌體，應(yīng)先用含³²P的培養(yǎng)基培養(yǎng)其宿主——大腸桿菌，再讓噬菌體侵染被³²P標(biāo)記的大腸桿菌即可。