Question

【題目】運(yùn)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將奶牛細(xì)胞中編碼凝乳酶的基因轉(zhuǎn)移到大腸桿菌細(xì)胞中，達(dá)到大規(guī)模生產(chǎn)凝乳酶的目的。下圖表示用作運(yùn)載體的質(zhì)粒和目的基因所在DNA片段。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>不符的是

A. 用限制酶BamHⅠ、PstⅠ和DNA連接酶構(gòu)建基因的表達(dá)載體

B. 用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選出的即為導(dǎo)入目的基因的細(xì)菌

C. 可用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因

D. 用Ca2+處理大腸桿菌使其易于轉(zhuǎn)化

Answer 1

【答案】B

【解析】

基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品�；�因工程技術(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。

A、限制酶不能破壞目的基因，也不能破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，且應(yīng)該用不同的限制酶進(jìn)行切割，以防止質(zhì)粒和目的基因自身的黏性末端連接或防止目的基因與載體反向連接，所以構(gòu)建圖示的重組質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)應(yīng)該選BamHI、PstI，用DNA連接酶將重組基因連接，正確；

B、運(yùn)載體和導(dǎo)入目的基因的載體上都存在氨芐青霉素抗性基因，因此不能依此來確定篩選出的是否為導(dǎo)入目的基因的細(xì)菌，錯誤；

C、可用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便、省時等特點(diǎn)，正確；

D、用Ca2+處理大腸桿菌增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，易于轉(zhuǎn)化，正確。

故選B。