Question

5．為了分離和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌，配制如下培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)．回答下列問題：

KH2PO4	NaHPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂	H2O
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g	1000mL

（1）從功能上看該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基；尿素的作用是提供氮源；鑒定尿素是否被分解可加酚紅試劑．
（2）在實(shí)驗(yàn)操作過程中，下列材料或用具：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶和吸管；③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手．需要滅菌的是：①和②（填序號）．
（3）實(shí)驗(yàn)操作步驟中若取土樣lg，因土壤中細(xì)菌密度很大，需要不斷加以稀釋，將l0⁴～l0⁷倍的稀釋液分別吸取0.2mL加入到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中統(tǒng)計(jì)3個平板上的菌落數(shù)．為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，若3個平板菌落數(shù)分別為219、212、256，則每克該土壤樣品中的菌株數(shù)為1.145×10⁹個．

Answer 1

分析 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計(jì)數(shù)的關(guān)鍵是經(jīng)梯度稀釋后的學(xué)生倍數(shù)要合適，計(jì)數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，該培養(yǎng)基要分離和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌，因此從功能上看該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，并且尿素應(yīng)該作為該培養(yǎng)基的唯一氮源；鑒定尿素是否被分解可加酚紅試劑．
（2）①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管，需要滅菌，而③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手需要消毒．
（3）實(shí)為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．在對位稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中統(tǒng)計(jì)3個平板上的菌落數(shù)分別為：219、212、256，則每克該土壤樣品中的菌株數(shù)為=（219+212+256）÷3×10⁶÷0.2=1.145×10⁹個．
故答案為：
（1）選擇    提供氮源    酚紅
（2）①和②
（3）30～300       1.145×10⁹

點(diǎn)評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分、種類以及培養(yǎng)基的制備，能夠根據(jù)表格獲取有效解題信息，難度適中．