Question

15．臨床試用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗．實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性．回答下列問題：
（1）為了從樣本中獲取致病菌菌落，可用平板劃線法或稀釋涂布平板法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得．
（2）取該單菌落適當稀釋，用稀釋涂布平板法接種于固體培養(yǎng)基表面，注意接種量小于0.1毫升，將平板倒置放在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板．
（3）為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A，B，C，D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B不敏感；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對A弱；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的耐藥菌．
（4）根據(jù)上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選擇抗生素A．

Answer 1

分析 （1）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．
（2）根據(jù)材料分析，透明圈的出現(xiàn)，說明該菌不能生長．

解答 解：（1）微生物分離與培養(yǎng)過程中，分離菌落常用稀釋涂布平板法或劃線涂布法．
（2）取該單菌落適當稀釋，用稀釋涂布平板法接種于固體培養(yǎng)基表面，注意接種量小于0.1毫升，并且將平板倒置放在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板．
（3）在抗藥性檢驗過程中，如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細菌；透明圈的大小表示著此種抗生素抗菌的強弱．據(jù)此可判斷抗菌強弱依次是A、C、B；D的透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，說明該菌落對此種抗生素具有耐藥性．
（4）根據(jù)（3）的分析，實驗結果抗生素A對該致病菌的作用最好．
故答案為：
（1）平板劃線法　   稀釋涂布平板
（2）稀釋涂布平板     0.1       倒置
（3）敏感    不敏感　 該致病菌對C的敏感性比對A弱   耐藥菌
（4）A

點評 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠識記培養(yǎng)過程中的接種方法，具有一定的分析實驗結果獲取結論的能力和利用所學的微生物知識解決生活問題的能力．