Question

農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上廣泛使用一種含氮有機(jī)化合物的除草劑在土坡中不易降解，長期使用可導(dǎo)致土壤污染．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序篩選出能降解該除草劑的細(xì)菌．（已知含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）

（1）從長期使用該除草劑的土坡中取上樣時(shí)，一般要先鏟去

 

．
（2）配制的培養(yǎng)基含有

 

類營養(yǎng)物質(zhì)．培養(yǎng)基在各種成分都溶化后滅菌之前，要進(jìn)行的操作是

 

（3）圖示過程采用了

 

法將菌種接種在平板上，然后將培養(yǎng)皿

 

放在恒溫菌中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上形成的菌落．
（4）科研人員另取土樣5g，在酒精燈火焰旁加入45mL的

 

中配制成稀釋10倍土壤溶液，然后再配制一定濃度梯度的土壤溶液．將10²倍的稀釋液吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用

 

將菌液鋪平，將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h-48h，每隔一定時(shí)觀察并統(tǒng)計(jì)具有

 

（現(xiàn)象）
的菌落數(shù)．結(jié)果如下表，則每克土壤樣品中目的菌株數(shù)是

 

．

時(shí)間	0	4	8	12	16	24	28	32	36	40	44	48
菌落數(shù)	0	0	8	20	24	37	40	40	40	31	15	5

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的利用,微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基．培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)是碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，培養(yǎng)基在各種成分都溶化先調(diào)節(jié)pH后滅菌．固體培養(yǎng)基上的接種方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答： 解：（1）篩選能降解該除草劑的細(xì)菌，進(jìn)行土壤取樣時(shí)，一般要先鏟去表層土．
（2）培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)是碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等4種，培養(yǎng)基在各種成分都溶化先調(diào)節(jié)pH后滅菌．
（3）據(jù)圖分析：圖示過程采用的是平板劃線法接種，接種后需要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，以防水汽凝集滴入培養(yǎng)基而污染．
（4）梯度稀釋時(shí)，為避免污染，應(yīng)該使用無菌水稀釋，進(jìn)行目的微生物的鑒別時(shí)可以使用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)，接種使用的工具是涂布器，由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明，能降解該除草劑的細(xì)菌形成的菌落可以出現(xiàn)透明帶，所以可以鑒別降解該除草劑的細(xì)菌．據(jù)表分析：應(yīng)當(dāng)選擇28、30、32小時(shí)時(shí)的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)，所以每克土壤樣品中目的菌株數(shù)是4.0×10⁵．
故答案為：
（1）表層土
（2）4     調(diào)節(jié)pH
（3）平板劃線    倒置
（4）無菌水     涂布器     透明帶     4.0×10⁵

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在強(qiáng)化微生物培養(yǎng)的所以操作過程，提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能．