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【題目】紅細胞內含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他哺乳動物的血液進行實驗,來提取和分離血紅蛋白。請回答下列有關問題:

(1)血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步:________、粗分離、純化和________

(2)實驗前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉,取血回來,馬上進行處理、離心后,收集血紅蛋白溶液。

以上所述的過程即是樣品處理,它包括紅細胞的洗滌、____________________、____________________。

(3)收集的血紅蛋白溶液要進行粗分離,其方法是________。然后通過________將樣品進一步純化,最后經________進行純度鑒定。

(4)下圖是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品加入和洗脫示意圖。請據圖回答下列問題。

①在加樣品示意圖中,正確的順序是___________________。

②用吸管加樣品時,應注意正確操作,分別是______________、______________、________________。

③待________________時,才加入緩沖溶液。

④待________接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每________mL收集一管,連續(xù)收集。

【答案】 樣品處理 純度鑒定 血紅蛋白的釋放 分離血紅蛋白溶液 透析 凝膠色譜法 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 ④→①→②→③ 不能破壞凝膠面 貼著管壁加樣 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動 樣品完全進入凝膠層 紅色的蛋白質 5

【解析】試題分析:血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步:樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定;樣品處理包括四個步驟,即紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析透析袋是利用半透膜制作的,半透膜可以讓小分子可以自由進出,而大分子不能通過;樣品純化的目的是通過凝膠色譜法將相對分子質量大的蛋白質除去。

(1)血紅蛋白的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

(2)樣品處理包括紅細胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析四步。

(3)收集的血紅蛋白溶液要通過透析的方法進行粗分離;樣品的純化是通過膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去,最后經SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳進行純度鑒定。

(4)①加樣和洗脫的具體過程為:調節(jié)緩沖液面加入蛋白質樣品調節(jié)緩沖液面洗脫收集分裝蛋白質,因此正確的加樣順序是④→①→②→③。

用吸管加樣時,應注意的正確操作分別是: 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動;貼著管壁加樣不要破壞凝膠面。

③待樣品完全進入凝膠層時,才加入緩沖溶液。

④待紅色的蛋白質接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每5mL收集一管,連續(xù)收集。

練習冊系列答案
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B. 3與4組合看到的視野最暗,細胞數(shù)目最少

C. 將位于視野右上方的物像移向中央時,應右上方移動玻片標本

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B.圖中表示水分的吸收,表示水的光解

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實驗步驟:

①把大量對鏈酶素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的表面,進行培養(yǎng)。

②待其長出密集的小菌落后,用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上,隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上,進行培養(yǎng)。

③在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個別抗鏈霉素的菌落,將其挑選出。

請回答:

(1)配制培養(yǎng)基時除了滿足基本的營養(yǎng)條件外,還需滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質、_______、_________的要求。

(2)從功能上看,含有鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_________培養(yǎng)基。若在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍,則培養(yǎng)皿中長出的菌落顏色為_________。由圖可知,1號培養(yǎng)基接種的方法為_________。

(3)對2和3進行比較,在2上找到與3上相應的菌落,挑取其中一個菌落接種到_________(含鏈霉素/不含鏈霉素)的培養(yǎng)基上,如果有較多的菌落出現(xiàn),則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之_________(前/后)。

(4)3中的菌落比1、2中的菌落少很多,這說明了基因突變具有_________的特點。

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