Question

15．單克隆抗體技術(shù)在人類疾病的診斷、治療方面具有廣闊的應(yīng)用前景．莫羅單抗是美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用于腎移植病人防止異體排斥反應(yīng)的第一只單克隆抗體，該藥通過與所有成熟的T細(xì)胞相互作用，可有效的抑制淋巴細(xì)胞．回答下列問題；
（1）莫羅單抗可通過細(xì)胞工程來制各，在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時，可使用的物理方法有離心、振動、電激（至少答出兩種），不同于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的技術(shù)手段是利用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合．
（2）制各過程中還需用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選融合細(xì)胞，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞均不能生長，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長，這種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體．
（3）莫羅單抗若通過基因工程來制備，該技術(shù)的核心關(guān)鍵是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，所用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞所采用的技術(shù)是顯微注射技術(shù)．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備
（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞
（2）獲得雜交瘤細(xì)胞
①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體．
（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取
2、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．

解答 解：（1）在誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合時，可使用的物理方法有離心、振動、電激，不同于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的技術(shù)手段是-利用滅活的病毒誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合．
（2）制各過程中還需用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選融合細(xì)胞，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞均不能生長，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長，這種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體．
（3）基因工程技術(shù)的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，所用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞所采用的技術(shù)是顯微注射技術(shù)．
故答案為：
（1）離心、振動、電激    滅活的病毒
（2）雜交瘤細(xì)胞    既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體
（3）基因表達(dá)載體的構(gòu)建       限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶   顯微注射技術(shù)

點(diǎn)評 本題考查動物細(xì)胞工程和基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記動物細(xì)胞工程和基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項．