Question

【題目】回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題：

⑴在動物細胞培養(yǎng)的過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面________________時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的_________。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是____，要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是________。

⑵隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)_________的現(xiàn)象；但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，朝著等同于癌細胞的方向發(fā)展，獲得_________性，并且遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，該種細胞的黏著性_________，細胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量_________。

⑶現(xiàn)用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不染色，原因是_____________________________。

⑷檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選用分裂到____期的細胞用顯微鏡進行觀察。

⑸在細胞培養(yǎng)過程中，通常在____條件下保存細胞，因為在這種條件下，細胞中_____的活性降低，細胞的新陳代謝速率降低。

⑹根據(jù)細胞在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶上的生長特征，要求培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面光滑、_________、易于_________。動物細胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中要加入的營養(yǎng)成分與植物不同的是_______________等。

Answer 1

【答案】相互接觸 接觸抑制 單層（或一層） 胰蛋白酶 衰老甚至死亡 不死性 降低 減少 由于活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內(nèi)，故活細胞不能著色（或由于死細胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而著色） 中 冷凍（或超低溫、液氮） 酶 無毒 貼附 動物血清、血漿

【解析】

據(jù)題文描述可知：本題考查學生對動物細胞培養(yǎng)技術(shù)等相關(guān)知識的識記和理解能力。

(1) 動物細胞培養(yǎng)時，制備的細胞懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，此現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是單層。貼滿瓶的細胞需要用胰蛋白酶處理，才能使其從瓶壁上分離下來。

(2) 一般來說，細胞在傳至10～50代左右時，增殖會逐漸減慢，以至于完全停止，這時絕大部分細胞出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象，只有極少數(shù)細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，克服細胞壽命的自然極限，朝著等同于癌細胞的方向發(fā)展，獲得不死性而得以存活。這些極少數(shù)細胞的黏著性降低，細胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量減少。

(3) 由于活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內(nèi)，因此活細胞不能被染色；當細胞死亡后，膜喪失了選擇透過性，大分子染料能進入細胞內(nèi)，所以死細胞能被染色。

(4) 因處于有絲分裂中期細胞內(nèi)的染色體形態(tài)比較穩(wěn)定，數(shù)目比較清晰，是觀察辨認染色體的最佳時期，所以檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目時，最好選用分裂到中期的細胞用顯微鏡進行觀察。

(5) 因為在冷凍（或超低溫、液氮）條件下，細胞的新陳代謝速率因其中酶的活性降低而降低，所以在細胞培養(yǎng)過程中，通常在冷凍（或超低溫、液氮）條件下保存細胞。

(6) 在動物細胞培養(yǎng)過程中，細胞的分裂和生長是貼附在瓶壁上進行的，所以要求培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。由于人們對動物細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此用于培養(yǎng)動物細胞的合成培養(yǎng)基中，除了加入水、無機鹽、維生素、葡萄糖、氨基酸等必需的營養(yǎng)成分外，往往要加入一些動物血清、血漿等天然成分；植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中不添加動物血清、血漿等成分。