Question

科學(xué)家將外源目的基因與大腸桿菌的質(zhì)粒進(jìn)行重組，并在大腸桿菌中成功表達(dá)。下圖表示構(gòu)建重組質(zhì)粒和篩選含目的基因的大腸桿菌的過程。請據(jù)圖回答：

（1）步驟①和②中常用的工具酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

  （2）經(jīng)過①和②步驟后，有些質(zhì)粒上的＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿基因內(nèi)插入了外源目的基因，形成重組質(zhì)粒。

  （3）步驟③是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的過程。為了促進(jìn)該過程，應(yīng)該用＿＿＿＿＿處理大腸桿菌。

  （4）步驟④：將三角瓶內(nèi)的大腸桿菌接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基C上培養(yǎng)，目的是篩選＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。能在C中生長的大腸桿菌有＿＿＿種。

  （5）步驟⑤:用無菌牙簽挑取C上的單個(gè)菌落，分別接種到D（含氨芐青霉素和四環(huán)素）和E（含四環(huán)素）兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上，一段時(shí)間后，菌落的生長狀況如圖所示。含目的基因的菌落位于（選填“D”或“E”）＿＿＿＿上，請?jiān)趫D中相應(yīng)的位置上圈出來。

Answer 1

（8分）（1）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶 （2）氨芐青霉素抗性 （3）將重組質(zhì)粒（目的基因）導(dǎo)入大腸桿菌（受體細(xì)胞）   CaCl₂溶液  （4）含四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌（含抗性基因的大腸桿菌給分，但回答含目的基因的大腸桿菌不給分）    2  

（5）E     （在兩個(gè)菌落中圈一個(gè)也可給1分）