Question

如圖是將動物的生長激素基因?qū)�入細菌細胞�?nèi)，產(chǎn)生“工程菌”的示意圖．請據(jù)圖回答：
（1）在“工程菌”細胞內(nèi)，控制細菌合成胰島素的基因、控制細菌主要性狀的基因依次存在于

 

、

 

上．
（2）在構(gòu)建重組運載體B的過程中，需要

 

種限制酶切割

 

個磷酸二酯鍵．
（3）將重組DNA分子導入細菌細胞，常用方法是

 

．
（4）在該工程中限制酶能識別的序列和切點是一G^↓GATCC一，請畫出質(zhì)粒被切割形成的黏性末端．

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運載體．需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過DNA連接酶連接目的基因和運載體．將目的基因?qū)�入植物細胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
2、分析題圖：圖示是將動物的生長激素基因?qū)�入細菌細胞�?nèi)，產(chǎn)生“工程菌”的過程，其中A表示動物的生長激素基因，B表示基因表達載體．

解答： 解：（1）在“工程菌”細胞內(nèi)，控制細菌合成胰島素的基因存在于重組質(zhì)粒上，控制細菌主要性狀的基因存在于核區(qū)大型環(huán)狀DNA上．
（2）切割質(zhì)粒和含有目的基因的DNA片段可用同種限制酶，以產(chǎn)生相同的黏性末端．獲取一個目的基因需限制酶剪切兩次，切割4個磷酸二酯鍵，切割質(zhì)粒需限制酶剪切一次，切割2個磷酸二酯鍵．因此在構(gòu)建重組運載體B的過程中，需要同（一）種限制酶切割6個磷酸二酯鍵．
（3）將重組DNA分子導入細菌細胞，常用方法是鈣離子處理，增大細菌細胞壁的通透性，使細菌變成感受態(tài)細胞．
（4）在該工程中限制酶能識別的序列和切點是一G^↓GATCC一，則質(zhì)粒被切割形成的黏性末端為．
故答案為：
（1）重組質(zhì)粒            核區(qū)大型環(huán)狀DNA
（2）同（一）             6
（3）鈣離子
（4）（見右圖）

點評：本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或的能力．要注意，獲取目的基因和切割載體時使用同種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端．獲取一個目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生 4個黏性末端或平末端．限制酶切割位點的選擇必須保證標記基因的完整性，以便于檢測．