Question

8．在農(nóng)業(yè)用地中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度一定，該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．

（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理．
（2）要從富含（或長期使用）該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點是：固體培養(yǎng)基且以除草劑為唯一氮源．若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH，應(yīng)該在各種成分都溶化后且分裝前（填“前”或“后”）進行．對培養(yǎng)基進行滅菌，常采用的方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）若對活菌進行計數(shù)，常用的接種方法為稀釋涂布平板法．
（4）培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長．
（5）為了計數(shù)微生物的數(shù)量，一位同學(xué)在4個平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為10⁶的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為155、160、176、149個，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為1.6×10⁹．

Answer 1

分析 微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作，從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．梳理微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的相關(guān)知識，分析題圖和各小題即可正確作答．

解答 解：（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，將濃度高的溶液通過稀釋的方法降低濃度．
（2）取樣時應(yīng)該從富含（或長期使用）該除草劑的土壤中取樣，利用該培養(yǎng)基的目的是篩選能降解除草劑的細(xì)菌，需要使用選擇培養(yǎng)基，即培養(yǎng)基中應(yīng)加入除草劑作為唯一的氮源的固體培養(yǎng)基；調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH應(yīng)在分裝前進行．培養(yǎng)基的滅菌一般使用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（3）對微生物活菌計數(shù)的接種方法常采用稀釋涂布平板法．
（4）由于培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長，所以培養(yǎng)后只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長．
（5 ）根據(jù)題意，每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為（155+160+176+149）÷4÷0.1×10⁶=1.6×10⁹．
故答案為：
（1）稀釋    
（2）富含（或長期使用）該除草劑   固  　除草劑為唯一氮源  前　高壓蒸汽滅菌
（3）稀釋涂布平板法      
（4）培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源    
（5）1.6×10⁹

點評 本題考查微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用，意在強化學(xué)生對微生物的篩選、培養(yǎng)的相關(guān)知識的識記、理解與運用，難度中等．