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科目：高中生物 來源：佛山市2007年普通高校招生第二次模擬考試生物試題 題型：071

圓褐固氮菌是自生固氮菌，為經濟有效地提高農作物產量，人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進行，PCR技術有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時代，從復雜的細胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質是該研究要做的基本工作之一。

（1）某同學在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起，已知青霉素會影響固氮菌的生長繁殖，但不影響真菌的生長繁殖。請?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實驗步驟：

①分別配置________的培養(yǎng)基和________的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標上A、a、B、b備用；

②分別向A、B培養(yǎng)基接種________；

③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d－4d；

④從A、B培養(yǎng)基上生長的________中挑取生長良好的菌株，分別接種到________中；

⑤________。

（2）用基因工程技術從經過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因，然后進行PCR擴增。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應體系及反應條件。

①從上表中可得出，PCR技術與DNA復制相比較，主要區(qū)別之一是________。

此外，從反應條件看，所使用的DNA聚合酶應具有________的特點。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是________。

②下圖為第1輪循環(huán)產生的產物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經PCR擴增的產物。

（3）在對固氮基因產物的生產研究中，需要從復雜的細胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質。下圖表示蛋白質提取和分離實驗涉及的相關原理。

①圖甲表示相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠色譜法分離的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對分子質量較大的蛋白質，原因是________。

②圖乙所示實驗模擬電泳現(xiàn)象，U型管左側的顏色逐漸變深，原因是________。

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科目：高中生物 來源：2013-2014學年浙江杭州二中高三上期第二次月考生物卷（解析版） 題型：綜合題

（10分）2013年初，我國部分地區(qū)陷入嚴重的霧霾和污染天氣中，北京的空氣污染指數(shù)PM2.5曾接近1000。據(jù)統(tǒng)計，北京近十年來肺癌患者增加了60%，引起肺癌的因素有多種，如大氣污染、吸煙、免疫力降低等。

分析以下材料，回答相關問題：

材料I：某學生研究小組用生理鹽水制備香煙浸出液，進行“香煙生理鹽水浸出液對大鼠體重影響” 的研究。

（1）將生理狀態(tài)相似的大鼠隨機分為三組，每天同一時間分別對小劑量組和中劑量組按每百克體重1.0ml灌胃不同濃度的香煙生理鹽水浸出液，同時對照組按灌胃 _。結果如上圖所示。由圖可以得出的結論是。

（2）若進一步研究香煙生理鹽水浸出液對大鼠身體健康的影響，還需對肝臟病理、肺部纖維增生程度進行檢查，可通過細胞培養(yǎng)觀察細胞，如果可判斷為癌變。

材料II：研究人員利用基因工程技術對肺癌的治療進行了大量研究，肺部細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術將let-7基因導入肺癌細胞實現(xiàn)表達，發(fā)現(xiàn)肺癌細胞的增殖受到抑制。

該基因工程技術基本流程如圖所示，據(jù)圖回答。

（3）形成重組載體時，需用酶切割、。

（4）進行過程②時，需用酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞，以利于傳代培養(yǎng)。

（5）研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響RAS基因的表達，其影響機理如圖乙所示。從分子水平的角度分析，其作用機理是let-7基因通過轉錄形成miRNA，與RASmRNA通過結合，從而使無法以RASmRNA為模板完成RAS蛋白的合成。抑制肺癌細胞的增殖。

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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

圓褐固氮菌是自生固氮菌，為經濟有效地提高農作物產量，人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進行，PCR技術有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時代，從復雜的細胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質是該研究要做的基本工作之一。

（1）某同學在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起，已知青霉素會影響固氮菌的生長繁殖，但不影響真菌的生長繁殖。請?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實驗步驟：

①分別配置的培養(yǎng)基和的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標上A、a、B、b備用；

②分別向A、B培養(yǎng)基接種；

③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d；

④從A、B培養(yǎng)基上生長的中挑取生長良好的菌株，分別接種到中；

⑤ 。

（2）用基因工程技術從經過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因，然后進行PCR擴增。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應體系及反應條件。

PCR反應體系	50ul
緩沖液	5ul
脫氧核苷酸	1ul
引物A	0.5ul
引物B	0.5ul
DNA聚合酶	0.5U
模板DNA	1-2ul
加去離子水補足至50 ul

反應條件
	溫度	時間
變性	95℃	30s
復性	55℃	30s
延伸	72℃	1min
30個循環(huán)后	適宜	5-10min
保溫	4℃	2h

①從上表中可得出，PCR技術與DNA復制相比較，主要區(qū)別之一是。

此外，從反應條件看，所使用的DNA聚合酶應具有__________的特點。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________ ________________。

②下圖為第1輪循環(huán)產生的產物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經PCR擴增的產物。

（3）在對固氮基因產物的生產研究中，需要從復雜的細胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質。下圖表示蛋白質提取和分離實驗涉及的相關原理。

①圖甲表示相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠色譜法分離的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對分子質量較大的蛋白質，原因是。

②圖乙所示實驗模擬電泳現(xiàn)象，U型管左側的顏色逐漸變深，原因是。

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科目：高中生物 來源： 題型：

人的血清蛋白在臨床上需求量很大，它通常是從人的血液中提取出來而獲得的。由于艾滋病病毒等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血制品顧慮重重。而基因工程技術的應用，使人類可以從動物體內獲得大量的安全優(yōu)質的血清蛋白。其操作過程主要是將人類血清蛋白基因與病毒DNA構成重組DNA，然后通過顯微注射技術將重組DNA轉移到奶牛的受精卵中，最后可從該受精卵發(fā)育成的雌牛的乳汁中分離出人們所需要的血清蛋白。試分析回答下列問題：?

（1）臨床上病人血清蛋白　　，往往造成組織水腫，其主要原因是　　　　　　　。?

（2）基因工程中所需的人類血清蛋白基因一般是用　　　方法得到的。?

（3）重組DNA的產生過程，一般先后要用到以下兩種工具酶：　　　　　。?

（4）人的血清蛋白基因能在奶牛體內表達成功，說明人體與奶牛細胞共用了一套相同的　　，這個事實也是　在分子生物學上的一個證據(jù)。

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科目：高中生物 來源：2006年上海卷單科生物高考（答案） 題型：簡答題

本題為分叉題。A適用于《生命科學》教材，B適用于《生物》教材。A和B中任選一題，兩題都做以A給分。

A．農業(yè)科技工作者在煙草中找到了一抗病基因，現(xiàn)擬采用基因工程技術將該基因轉入棉花，培育抗病棉花品系。請回答下列問題。

(1)要獲得該抗病基因，可采用 ▲ 、 ▲ 等方法。為了能把該抗病基因轉入到棉花細胞中，常用的載體是 ▲ 。

(2)要使載體與該抗病基因連接，首先應使用 ▲ 進行切割。假如載體被切割后，得到的分子末端序列為，則能與該載體連接的抗病基因分子末端是……………………………………………………( )