Question

12．如圖為培育轉基因抗蟲棉的技術流程．請據(jù)圖回答：

（1）進行過程①，先要運用的酶是限制酶，限制酶的特點是識別特定序列，切割特點位點．
（2）基因工程核心步驟的名稱是基因表達載體的構建．
（3）③過程的培養(yǎng)基除含有必需的營養(yǎng)物質、瓊脂外，還需要添加植物激素
（4）④過程的實質是基因選擇性表達，過程③④所表達的兩個重要的生理現(xiàn)象是脫分化和再分化．
（5）過程②采用最多的方法是農桿菌轉化法．農桿菌中的Ti質粒上T-DNA具有把目的基因轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體DNA上的特點．把目的基因導入受體細胞，檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是看目的基因是否轉錄出mRNA，檢測時常用的方法是分子雜交．
（6）經檢測抗蟲棉細胞染色體上含有一個抗蟲基因，該植株自交得到F₁，其中全部的抗蟲植株再自交一次，后代中抗蟲植株占總數(shù)的$\frac{5}{6}$．

Answer 1

分析 1、基因表達載體的構建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用．基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因．
2、農桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上．
3、根據(jù)題意和圖示分析可知：①是基因表達載體的構建過程，②是將目的基因導入受體細胞的過程，③是脫分化過程，④是再分化過程．

解答 解：（1）過程①是基因表達載體的構建過程，進行過程①時先要運用的酶是限制酶，限制酶的特點是識別特定序列，切割特點位點．
（2）基因工程核心步驟的名稱是基因表達載體的構建．
（3）③是脫分化過程，其培養(yǎng)基除含有必需的營養(yǎng)物質、瓊脂外，還需要添加植物激素如生長素和細胞分裂素．
（4）④過程的實質是基因選擇性表達，過程③④所表達的兩個重要的生理現(xiàn)象是脫分化和再分化．
（5）過程②是將目的基因導入受體細胞的過程，在植物基因工程中常用農桿菌轉化法．農桿菌中的Ti質粒上T-DNA具有把目的基因轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體DNA上的特點．把目的基因導入受體細胞，檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是看目的基因是否轉錄出mRNA，檢測時常用的方法是分子雜交．
（6）抗蟲棉細胞染色體上含有一個抗蟲基因（用A表示），那么該植株可看做是雜合子（Aa），自交得到的F_l有三種基因型（AA、Aa、aa），如果其中全部的抗蟲植株（$\frac{1}{3}$AA、$\frac{2}{3}$Aa）再自交一次，那么后代中不抗蟲植株占$\frac{2}{3}$×$\frac{1}{4}$=$\frac{1}{6}$，抗蟲植株占1-$\frac{1}{6}$=$\frac{5}{6}$．
故答案為：
（1）識別特定序列，切割特點位點
（2）基因表達載體的構建
（3）植物激素
（4）基因選擇性表達   脫分化和再分化
（5）農桿菌轉化法   把目的基因轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體DNA上   看目的基因是否轉錄出mRNA   分子雜交
（6）$\frac{5}{6}$

點評 本題考查基因工程及基因分離定律的相關內容，意在考查考生的識記能力、識圖能力和理解應用能力．