Question

19．（1）微生物培養(yǎng)中，對培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．在植物組織培養(yǎng)的過程中，也要對外植體等進行一序列的消毒、滅菌處理，并且要求無菌操作，原因是外植體體積小、抗性差、微生物會與外植體爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質（至少答出兩點）．
（2）為了從樣本中獲取某種致病菌單菌落，可用平板劃線法或稀釋涂布法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，再經過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟就可似獲得．
（3）根據培養(yǎng)基中出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計算出細菌數(shù)目往往比實際的數(shù)目低，原因是當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．
（4）為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色．

Answer 1

分析 1、植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株（新植體）．
2．實驗室常用的消毒方法
煮沸消毒；化學藥物消毒；紫外線消毒．
3．實驗室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內，為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．
4、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）微生物培養(yǎng)中，對培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．在植物組織培養(yǎng)的過程中，也要對外植體等進行一序列的消毒、滅菌處理，并且要求無菌操作，原因是外植體體積小、抗性差、微生物會與外植體爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質、微生物有可能產生對組織培養(yǎng)有害的物質等．
（2）為了從樣本中獲取某種致病菌單菌落，常見的接種方法有平板劃線法、稀釋涂布法將．
（3）細菌計數(shù)，由于兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此根據培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計算得出的數(shù)目往往比實際數(shù)目低．
（4）為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌      外植體體積小、抗性差；微生物會與外植體爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質；微生物有可能產生對組織培養(yǎng)有害的物質（任意答出兩條即可）
（2）平板劃線       稀釋涂布
（3）當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落
（4）選擇     酚紅      紅

點評 本題主要考查植物組織培養(yǎng)技術、消毒和滅菌的方法、接種方法等知識，意在強化學生對相關實驗操作的識記、理解與運用．