Question

10．在利用菜花進行“DNA粗提取與鑒定”實驗中，相關(guān)操作正確的是（　�。�

• A． 將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍
• B． 向菜花研磨液中加入適量的蒸餾水，以降低DNA酶活性
• C． 向質(zhì)量濃度為2 mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時，應(yīng)緩慢加入，直到出現(xiàn)黏稠物為止
• D． 向溶有粗提物的NaCl溶液中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)95%的酒精，可獲得較純凈的DNA

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性．
（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色．
2、DNA粗提取和鑒定的過程：
（1）實驗材料的選�。悍彩呛�有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細胞，獲取含DNA的濾液：
動物細胞的破碎比較容易，以雞血細胞為例，在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可．如果實驗材料是植物細胞，需要先用洗滌劑溶解細胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍．

解答 解：A、首先將DNA絲狀物溶解在一定濃度的氯化鈉溶液中，再滴加二苯胺試劑和水浴加熱，A錯誤；
B、向菜花研磨液中加入適量的蒸餾水，以降低DNA的溶解度，不是降低DNA酶的活性，B錯誤；
C、向質(zhì)量濃度為2 mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時，應(yīng)緩慢加入，直到出現(xiàn)的黏稠物不再增加為止，C錯誤；
D、DNA不溶于酒精，因此向溶有粗提物的NaCl溶液中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)95%的酒精，可獲得較純凈的DNA，D正確．
故選：D．

點評 本題考查DNA的粗提取和鑒定，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗現(xiàn)象等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累．