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(8分)下圖(一)為某基因工程中利用的質粒簡圖,小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點,ampR為青霉素(抗生素)抗性基因,tctR為四環(huán)素(抗生素)抗性基因。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。下圖(二)為幾種酶作用于基因的位置。請回答下列問題:

(1)在基因工程中常用的工具有三種:一是用作切取目的基因的              酶;二是將目的基因與運載體拼接的               酶;三是作為運載體的質粒。

(2)將含有目的基因的DNA與經特定的酶切后的運載體(質粒)進行拼接形成重組DNA,理論上講,重組DNA可能有:目的基因-目的基因、目的基因-運載體和運載體-運載體三種,其中有效的(所需要的)重組DNA是                  ,因此需要對這些拼接產物進行分離提純。

(3)利用圖(一)所示的質粒拼接形成的3種拼接產物(重組DNA)導入無任何抗藥性的原核宿主細胞,并接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細胞所含有的拼接產物(重組DNA)是                。含有效的重組基因(目的基因-運載體)的原核宿主細胞在含青霉素的培養(yǎng)基上_________(能/不能)生長。

(4)在動物基因工程中,將重組DNA導入受體細胞的常用方法是          。

(5)圖(二)中,作用于a 位置的酶是               ;作用于b 位置的酶是                  。

 

【答案】

(1)限制酶(限制性核酸內切酶)      DNA連接酶

(2)目的基因-運載體

(3)運載體-運載體     能

(4)顯微注射法

(5)限制酶(限制性內切酶)     DNA解旋酶

【解析】

 

練習冊系列答案
相關習題

科目:高中生物 來源:2010年浙江省杭州學軍中學高三上學期第一次月考生物試題 題型:綜合題

(8分)為了解基因結構,通常選取一特定長度的線性DNA分子,先用一種限制酶切割,通過電泳技術將單酶水解片段分離,計算相對大小;然后再用另一種酶對單酶水解片段進行降解,分析片斷大小。下表是某小組進行的相關實驗。

 
已知
一線性DNA序列共有5000bp(bp為堿基對)
第一步水解
產物(單位bp)
第二步水解
產物(單位bp)
 
A切割酶
2100
將第一步水解分離后,分別用B酶切割
1900 200
1400
800  600
1000
1000
500
500
 
B酶切割
2500
將第一步水解產物分離后,分別用A酶切割
1900 600
1300
800  500
1200
1000 200
經A酶和B酶同時切割
1900    1000    800     600    500    200
(1)由實驗可知,在這段已知序列上,A酶與B酶的識別序列分別為         個和
       個。
(2)根據表中數據,請在下圖中標出相應限制性酶的酶切位點并注明相關片斷的大小。

(3)已知BarnH I與BglⅡ的識別序列及切割位點如右圖所示,用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數個BarnH工和BglⅡ識別序列的DNA分子進行反復的切割、連接操作,若干循環(huán)后                       序列明顯增多。

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科目:高中生物 來源: 題型:

為了解基因結構,通常選取一特定長度的線性DNA分子,先用一種限制酶切割,通過電泳技術將單酶水解片段分離,計算相對大小;然后再用另一種酶對單酶水解片段進行降解,分析片斷大小。下表是某小組進行的相關實驗。

已知

一線性DNA序列共有5000bp(bp為堿基對)

第一步水解

產物(單位bp)

第二步水解

產物(單位bp)

A切割酶

2100

將第一步水解分離后,分別用B酶切割

1900 200

1400

800  600

1000

1000

500

500

B酶切割

2500

將第一步水解產物分離后,分別用A酶切割

1900 600

1300

800  500

1200

1000 200

經A酶和B酶同時切割

1900    1000    800     600    500    200

(1)由實驗可知,在這段已知序列上,A酶與B酶的識別序列分別為    個和    個。

(2)根據表中數據,請在下圖中標出相應限制性酶的酶切位點并注明相關片斷的大小。

(3)已知BarnH I與BglⅡ的識別序列及切割位點如下圖所示,用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數個BarnH工和BglⅡ識別序列的DNA分子進行反復的切割、連接操作,若干循環(huán)后                         序列明顯增多。

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