Question

【題目】（銀負(fù)載二氧化鈦）作為一種常見的半導(dǎo)體光催化劑，在可見光照射下不僅可殺滅飲用水中的細(xì)菌等微生物，降解水中的有機(jī)化合物，還能循環(huán)利用，因此被廣泛使用。某研究小組制備了空心微球懸濁液，現(xiàn)欲探究不同載銀量的空心微球的殺菌性能�；卮鹣铝袉栴}：

（1）培養(yǎng)大腸桿菌：制備適宜大腸桿菌生長的培養(yǎng)基，將培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基等置于________中滅菌20min；在無菌環(huán)境中倒平板，待平板冷凝后，將平板倒置，是為了________；將大腸桿菌制備成菌懸液，分離純化。

（2）殺菌性能檢測：挑取菌落制成菌懸液，用________（工具）接種于無菌平板表面，使其均勻生長，布滿平板；將浸透了________的小濾紙片（實(shí)驗(yàn)組）和浸透了________的小濾紙片（空白對(duì)照），分別放在涂布好的平板的不同位置；將平板置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察記錄________。

（3）測定飲用水所含的大腸桿菌數(shù)目，還有一種特別的方法：將已知體積的飲用水過濾后，將________放在加入________的培養(yǎng)基上（大腸桿菌菌落呈黑色），根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，可計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。這種計(jì)數(shù)方法較實(shí)際值有誤差的原因是________。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌鍋 防止皿蓋上的冷凝水滴落，污染培養(yǎng)基 涂布器 不同載銀量的空心微球懸濁液 （等量）無菌水 濾紙片周圍抑菌圈（透明圈）大�。ㄖ睆剑� 濾膜 伊紅美藍(lán) 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、濾膜法是檢測水樣中大腸細(xì)菌群的方法。將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)數(shù)和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據(jù)過濾水樣計(jì)算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數(shù)。操作簡單、快速，主要適用于雜質(zhì)較少的水樣

（1）制備適宜大腸桿菌生長的培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)皿與培養(yǎng)基常置于高壓蒸汽滅菌鍋20min；倒平板時(shí)要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，還能促進(jìn)培養(yǎng)基表面水分的揮發(fā)。

（2）液體菌種進(jìn)行稀釋涂布平板法接種時(shí)需要用涂布器。為防止培養(yǎng)基污染，用浸透了不同載銀量的Ag/TiO2空心微球懸濁液的小濾紙片作為實(shí)驗(yàn)組和浸透了等量無菌水的小濾紙片作為空白對(duì)照，分別放在涂好菌的平板的不同位置；將平板置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察記錄濾紙片周圍抑菌圈（透明圈）大�。ㄖ睆剑�。

（3）伊紅美藍(lán)指示劑是鑒別大腸桿菌的指示劑，在測定飲用水所含的大腸桿菌數(shù)目時(shí)，將已知體積的飲用水過濾后，將濾膜放在加入伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落的顏色為具有金屬光澤的黑色。用稀釋涂布平板法的跡象微生物計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以此計(jì)數(shù)方法較實(shí)際值較低。