Question

【題目】下圖為綠色熒光小鼠制備流程圖，Gfp是綠色熒光蛋白基因，請分析回答：

(1)基因表達載體包含綠色熒光蛋白基因Gfp、__________________、終止子和復制原點等。Gfp基因整合到受體細胞中的染色體DNA上，能使目的基因的遺傳特性得以__________________________________，從而實現(xiàn)________過程。

(2)圖中載體上的Neo基因是一種抗生素抗性基因，圖中步驟③所用的G418是一種抗生素(對細胞有毒害作用)，添加G418的目的是__________________________________。

(3)圖中所用的胚胎干細胞來自于________________________________。

(4)圖中步驟⑤要將細胞注射入圖中囊胚的________位置，圖中步驟⑥胚胎移植前要對代孕母鼠用激素進行________處理。

(5)可以使用____________________方法在蛋白質水平上鑒定小鼠是否存在綠色熒光蛋白。

Answer 1

【答案】 標記基因，啟動子 維持穩(wěn)定和表達 轉化 鑒定和篩選出導入目的基因的胚胎干細胞 早期胚胎或原始性腺 內細胞團 同期發(fā)情 抗原-抗體雜交

【解析】試題分析：分析題圖：圖示為綠色熒光小鼠制備流程圖，其中①表示基因表達載體的構建過程；②表示將表達載體導入胚胎干細胞；③表示胚胎干細胞的體外培養(yǎng)過程；④表示沖卵，即沖出胚胎的過程；⑤表示將胚胎干細胞團注入囊胚；⑥表示胚胎移植過程。

（1）基因表達載體的組成包括目的基因（綠色熒光蛋白基因Gfp）、標記基因、啟動子、終止子和復制原點等。Gfp基因整合到受體細胞中的染色體DNA上，能使目的基因的遺傳特性得以維持穩(wěn)定和表達，從而實現(xiàn)轉化過程。

（2）步驟③所用的G418是一種抗生素，其作用是篩選出導入目的基因的胚胎干細胞。

（3）胚胎干細胞來自于早期胚胎或原始性腺。

（4）囊胚包括滋養(yǎng)層細胞和內細胞團細胞，其中滋養(yǎng)層細胞將發(fā)育成胎盤和胎膜，而內細胞團細胞將發(fā)育成各種組織，因此圖中步驟⑤要將細胞注射入圖中囊胚的內細胞團位置；圖中步驟⑥胚胎移植前要對代孕母鼠用激素處理，目的是進行同期發(fā)情處理。

（5）從分子水平上檢測小鼠是否存在綠色熒光蛋白，可采用抗原-抗體雜交法。