下圖為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育 過程流程圖,其中質(zhì)粒上的Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見下表。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:

(1)形成重組質(zhì)粒A時(shí),應(yīng)選用限制酶__          _,對(duì)     _     __進(jìn)行切割。

(2)一個(gè)質(zhì)粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同時(shí)切割后可得到__   __個(gè)DNA片段,

        個(gè)黏性末端。

(3)培養(yǎng)基中的 氨芐青霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長,欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞,應(yīng)使重組質(zhì)粒A中含有                   基因。

(4)要培養(yǎng)既抗病又無病毒的香蕉植株,應(yīng)將農(nóng)桿菌導(dǎo)入          細(xì)胞中。再進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)。

(5)以上獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉植株的過程中,所用到的原理有               

 

【答案】

 

(1) Pst I和EcoRI(寫全給分)   含抗病基因的DNA和質(zhì)粒 (一個(gè)1分,光寫“目的基因”者不給分)

(2)  3    4(3)抗氨芐青霉素(或氨芐青霉素抗性)

(4)根(莖、芽)尖(或分生組織)

(5)基因重組   植物細(xì)胞具有全能性(一個(gè)1分)

【解析】

試題分析:(1)形成重組質(zhì)粒時(shí)應(yīng)含目的基因時(shí),而Sma I,切割目的基因時(shí)會(huì)破壞目的基因,所以選Pst I和EcoRI,對(duì)目的基因切割,不會(huì)對(duì)目的基因造成破壞,所以使用者兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。(2)質(zhì)粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同時(shí)切割,會(huì)被分割成三段, EcoR I、Pst l切割質(zhì)粒形成的是黏末端,每種酶切割質(zhì)粒會(huì)形成兩個(gè)黏性末端,總的會(huì)產(chǎn)生4個(gè)黏性末端, Sma I形成的是平末端,所以三種限制酶切割質(zhì)粒會(huì)形成四個(gè)黏性末端。(3)培養(yǎng)基中的 氨芐青霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長,所以導(dǎo)入的重組質(zhì)粒中要含氨芐青霉素抗性基因,才能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基是生長。(4)要培養(yǎng)無病毒的香蕉植株,一般選用植物的根莖芽尖端,因?yàn)橹参锔o芽尖生長快,無病毒,在這樣的植物根莖芽尖細(xì)胞中導(dǎo)入含目的基因的農(nóng)桿菌后,可培養(yǎng)既抗病又無病毒的香蕉植株。(5)結(jié)合題目可知培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因抗病毒香蕉使用所用的原理有基因過程中的基因重組,及植物細(xì)胞工程中的植物細(xì)胞全能性。

考點(diǎn):本題考查基因工程的應(yīng)用的知識(shí),意在考查學(xué)生對(duì)基因工程的相應(yīng)知識(shí)的理解能力及在較復(fù)雜情景中綜合運(yùn)用相應(yīng)知識(shí)進(jìn)行分析、判斷、推理和評(píng)價(jià)的能力。

 

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下圖為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程示意圖。其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ等為相應(yīng)限制性內(nèi)切酶的切點(diǎn),同時(shí)質(zhì)粒中含有卡那霉素的抗性基因(Kanr)。以下有關(guān)培育過程的說法不正確的是(   )

A.①過程為脫分化,細(xì)胞數(shù)目不變
B.①②過程需要激素支持,但不需要二氧化碳培養(yǎng)箱
C.在含抗病基因的DNA和質(zhì)粒中,可能不只含有1個(gè)PstⅠ限制酶的識(shí)別序列
D.用含卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)香蕉組織塊時(shí),導(dǎo)入普通質(zhì)粒的組織細(xì)胞也能存活

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(1)圖中①②表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的____。圖中a過程的方法稱為____。目的基因能否在香蕉體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是        。利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。上圖培養(yǎng)過程證明了香蕉組織細(xì)胞具有____。
(2)形成重組質(zhì)粒A時(shí),應(yīng)選用限制酶____,對(duì)    ___進(jìn)行切割。
(3)一個(gè)質(zhì)粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同時(shí)切割后可得到____個(gè)DNA片段,____個(gè)黏性末端。
(4)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長,欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞,應(yīng)使重組質(zhì)粒A中含有                  基因。

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A.①過程為脫分化,細(xì)胞數(shù)目不變

B.①②過程需要激素支持,但不需要二氧化碳培養(yǎng)箱

C.在含抗病基因的DNA和質(zhì)粒中,可能不只含有1個(gè)PstⅠ限制酶的識(shí)別序列

D.用含卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)香蕉組織塊時(shí),導(dǎo)入普通質(zhì)粒的組織細(xì)胞也能存活

 

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(1)圖中①②表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的____。圖中a過程的方法稱為____。目的基因能否在香蕉體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是         。利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。上圖培養(yǎng)過程證明了香蕉組織細(xì)胞具有____。

(2)形成重組質(zhì)粒A時(shí),應(yīng)選用限制酶____,對(duì)     ___進(jìn)行切割。

(3)一個(gè)質(zhì)粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同時(shí)切割后可得到____個(gè)DNA片段,____個(gè)黏性末端。

(4)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長,欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞,應(yīng)使重組質(zhì)粒A中含有                   基因。

 

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