Question

如圖為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)海參溶菌酶（SL）的流程．請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）過(guò)程I中首先在

 

作用下合成海參溶菌酶cDNA，再以cDNA為模板擴(kuò)增合成SL目的基因，擴(kuò)增過(guò)程中要用到具有熱穩(wěn)定性的

 

．
（2）過(guò)程Ⅱ中要用相同的

 

切割目的基因與

 

，再用

 

將二者連接起來(lái)，再導(dǎo)入大腸桿菌中，形成大腸桿菌工程菌．
（3）若要檢驗(yàn)SL目的基因是否成功表達(dá)，可以用

 

技術(shù)，若沒(méi)有出現(xiàn)相應(yīng)的雜交帶．則需要用

 

做探針來(lái)檢驗(yàn)是否轉(zhuǎn)錄出mRNA．
（4）已知海參溶菌酶中含145個(gè)氨基酸，則控制其合成的基因中至少含有

 

個(gè)脫氧核苷酸．
（5）溶菌酶廣泛存在于動(dòng)物的組織、體液及分泌物中，可以破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁，促進(jìn)細(xì)菌細(xì)胞的裂解，在動(dòng)物的

 

中發(fā)揮重要作用．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用

專題：

分析：以RNA為模板合成DNA的過(guò)程稱為逆轉(zhuǎn)錄，該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；擴(kuò)增目的基因采用的方法是PCR技術(shù)，該過(guò)程需要耐高溫的DNA聚合酶；割目的基因和切割質(zhì)粒最好使用同種限制酶，然后用DNA連接酶將產(chǎn)生的末端連接．檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，就是檢測(cè)是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，因此可采用抗原-抗體雜交；檢測(cè)目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄，可采用分子雜交，即用放射性同位素標(biāo)記的目的基因做為探針與RNA混合，根據(jù)是否出現(xiàn)雜交帶，判斷目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA；基因中的堿基個(gè)數(shù)：蛋白質(zhì)中氨基酸個(gè)數(shù)=6：1，因此基因中至少含有145×6=870個(gè)脫氧核苷酸；溶菌酶屬于免疫中的第二道防線，在非特異性免疫中有重要作用．

解答： 解：（1）以RNA為模板合成DNA的過(guò)程稱為逆轉(zhuǎn)錄，該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；擴(kuò)增目的基因采用的方法是PCR技術(shù)，該過(guò)程需要耐高溫的DNA聚合酶．
（2）切割目的基因和切割質(zhì)粒最好使用同種限制酶，然后用DNA連接酶將產(chǎn)生的末端連接．
（3）檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，就是檢測(cè)目的基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，因此可采用抗原-抗體雜交；檢測(cè)目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄，可采用分子雜交，即用放射性同位素標(biāo)記的目的基因做為探針與RNA混合，根據(jù)是否出現(xiàn)雜交帶，判斷目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA．
（4）基因中的堿基個(gè)數(shù)：蛋白質(zhì)中氨基酸個(gè)數(shù)=6：1，因此基因中至少含有145×6=870個(gè)脫氧核苷酸．
（5）溶菌酶屬于免疫中的第二道防線，在非特異性免疫中有重要作用．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄酶  DNA聚合酶
（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）   質(zhì)粒   DNA連接酶
（3）抗原-抗體雜交    帶同位素的目的基因
（4）870
（5）非特異性免疫

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查基因工程的過(guò)程和免疫的相關(guān)知識(shí)，盡管比較綜合，但難度不高．在根據(jù)蛋白質(zhì)中氨基酸個(gè)數(shù)計(jì)算基因中堿基的個(gè)數(shù)時(shí)，若不考慮終止密碼子時(shí)，直接用氨基酸個(gè)數(shù)×6，即可，若考慮終止密碼子，則還需要加6個(gè)脫氧核苷酸．