為了測定某種分解纖維素的微生物生長所需要的最適pH，某同學設(shè)計了下列實驗步驟：

①配制適宜的培養(yǎng)基，分別裝到錐形瓶中，用緩沖液分別調(diào)pH為4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，并分別標號為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ�！、趯⒚科颗囵B(yǎng)基等量分別裝到5支試管中，加棉塞并包扎成5捆�！、蹖⒃嚬芊诺�1個大燒杯中，在酒精燈上加熱煮沸10 min滅菌，待溫度冷卻到50℃，將試管擱置斜面�！、茉跓o菌條件下，往5組試管中接種等量的菌種。⑤25～28℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h。⑥測定每支試管中培養(yǎng)基的重量，記錄并統(tǒng)計分析結(jié)果。

（1）上述步驟中有5處明顯錯誤，請找出并加以改正。

（2）若按改正后的實驗步驟，請將預(yù)測結(jié)果用曲線圖表示走勢。

答案：
解析：

（1）①緩沖液調(diào)的pH范圍不對。多數(shù)細菌的最適宜pH在6.5～7.5之間，所以應(yīng)將緩沖液分別調(diào)pH為6.0、6.5、7.0、7.5、8.0。②試管包扎成捆后沒有做標記，這樣就分不清培養(yǎng)基的不同。應(yīng)該在每捆試管外掛上注明pH的標簽。③培養(yǎng)基滅菌的方法不對。培養(yǎng)基應(yīng)在100 kPa、121℃的高壓蒸汽鍋中保存15～20 min。④培養(yǎng)溫度和時間不對，細菌應(yīng)在30～37℃條件下培養(yǎng)1～2天。⑤不應(yīng)測培養(yǎng)基重量，應(yīng)測微生物的數(shù)目或菌體的重量。

（2）如答圖（以菌體重量為例）：

點撥：本題主要考查了纖維素分解菌的分離過程中。（1）①細菌生長的適宜pH接近中性或微堿性，題中設(shè)立的PH范圍在酸性范圍內(nèi)，不可取。②培養(yǎng)基分裝完畢，滅菌之前要對分裝后的試管進行標記，由于使用的試管數(shù)較多，避免混淆。③培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)用高壓蒸汽滅菌。④細菌生長的溫度范圍一般是30～37℃，此溫度下培養(yǎng)1～2 d才會長出菌落，24 h時間過短。⑤判斷微生物的多少，不應(yīng)直接稱量培養(yǎng)基，而應(yīng)測定微生物數(shù)目或稱量菌體的重量，測定微生物的數(shù)量可用稀釋涂布平板法或顯微鏡直接計數(shù)法等，也可直接稱量菌體重量，此法操作簡便。


練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源：2013屆四川省樂山市第一中學高三9月月考生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

（每空1分，共6分）如圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，據(jù)此回答有關(guān)問題：

(1) 要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫熱泉中尋找耐熱菌，這說明
__________________________________________________________。
(2) 接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實驗宜采用
______________法。
(3) 用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時，最好選擇菌落數(shù)在___________間的平板進行計
數(shù)。若統(tǒng)計出在一稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為30個，所用稀釋液的體積為
0.2 mL，則每克樣品中的菌落數(shù)為___________________。
(4) 在分離尿素分解菌所用的培養(yǎng)基中可加入___________________指示劑，根據(jù)指示劑的顏色可鑒定某種細菌能否分解尿素，若有分解尿素的細菌，培養(yǎng)基將會呈現(xiàn)____________。

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科目：高中生物 來源：2011-2012學年吉林省汪清六中高二下學期期末考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

（12分）如圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，據(jù)此回答有關(guān)問題：

(1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫熱泉中尋找耐熱菌，這說明________________________________________________________________________。
(2)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實驗宜采用_______________法。
(3)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時，最好選擇菌落數(shù)在___________間的平板進行計數(shù)。若統(tǒng)計出在一稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為30個，所用稀釋液的體積為0.2 mL，則每克樣品中的菌落數(shù)為__________________________________。
(4)在分離尿素分解菌所用的培養(yǎng)基中可加入___________________指示劑，根據(jù)指示劑的顏色可鑒定某種細菌能否分解尿素，若有分解尿素的細菌，培養(yǎng)基將會呈現(xiàn)____________

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科目：高中生物 來源：2011-2012學年上海市高三第三次月考生物試卷 題型：綜合題

生物乙醇是以生物為原料生產(chǎn)的可再生能源。我國利用農(nóng)作物廢棄物(秸稈)生產(chǎn)乙醇，其技術(shù)流程為：纖維素酶分解→酵母菌發(fā)酵→蒸餾→成品。如果向含有纖維素培養(yǎng)基中加入剛果紅染液時，剛果紅會與纖維素形成紅色復(fù)合物，而呈現(xiàn)紅色，如果纖維素被降解，則培養(yǎng)基表面會形成以纖維素分解菌為中心的透明圈�！≌埛治龌卮鹣铝袉栴}：

71、纖維素酶可以從能分解纖維素的細菌培養(yǎng)液中提取。某同學設(shè)計了從土壤中分離纖維素分解菌的實驗流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→鑒別培養(yǎng)。

 ①最好選擇           環(huán)境采集土樣。

 ②配置培養(yǎng)基時，各種成分在熔化后分裝前必須進行              ，接種前要進行         。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行。在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，應(yīng)將平板倒過來放置，這樣做的目的是                              。

③以下是兩種培養(yǎng)基配方：

A培養(yǎng)基配方：

KH2P04

Na2HP04

MgS04.7H20

纖維素酶

葡萄糖

尿素

瓊脂

1.4g

2.1g

0.2g

1g

10.0g

1.0g

15.og

B培養(yǎng)基配方：

KH2P04

NaN03

Na2HP04.7H20

MgS04.7H20

KCl

纖維素粉

酵母膏

水解酪素

0．9g

lg

1．2g

0．5g

0．5g

5g

0．5g

0．5g

 如果要分離提純土壤中的纖維素分解菌，應(yīng)選擇         (填編號) 培養(yǎng)基配方，從功能看該培養(yǎng)基屬于           培養(yǎng)基。

④為了鑒別纖維素分解菌和進一步純化菌種，可以在鑒別培養(yǎng)基中加入剛果紅染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用   　　   法接種到鑒別培養(yǎng)基上，然后挑選產(chǎn)生    　   的菌落作為菌種進行擴大培養(yǎng)。

72、進行工業(yè)化酶解時，為了使纖維素酶能反復(fù)使用，可以采用酶固定化技術(shù)，其具體方法包括如下圖所示的三種，則①表示            、②表示              、③表示載體結(jié)合法。

 

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科目：高中生物 來源：同步題 題型：實驗題

為了測定某種分解纖維素的微生物生長所需要的最適pH，某同學設(shè)計了下列實驗步驟：
①配制適宜的培養(yǎng)基，分別裝到錐形瓶中，用緩沖液分別調(diào)pH為4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，并分別標號為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。
②將每瓶培養(yǎng)基等量分別裝到5支試管中，加棉塞并包扎成5捆。
③將試管放到1個大燒杯中，在酒精燈上加熱煮沸10min滅菌，待溫度冷卻到50℃，將試管擱置斜面。
④在無菌條件下，往5組試管中接種等量的菌種。
⑤25℃~28℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。
⑥測定每支試管中培養(yǎng)基的質(zhì)量，記錄并統(tǒng)計分析結(jié)果。
(1)上述步驟中有5處明顯錯誤，請找出并加以改正。
(2)若按改正后的實驗步驟，請將預(yù)測的結(jié)果用曲線圖表示走勢。

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