Question

3．乙草胺是除草劑中常見的化學(xué)成分，在土壤和水體中存在時(shí)間長(zhǎng)，難以降解．請(qǐng)回答下列問題：
（1）實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中獲取乙草胺降解菌，需將土壤樣品置于以乙草胺為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)．
（2）該實(shí)驗(yàn)小組選取乙草胺濃度為800mg/L的富集液進(jìn)行系列稀釋，分別取10^-3/10^-4和10^-5倍數(shù)的稀釋液0.1mL涂布于培養(yǎng)基上，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布三個(gè)平板，各平板的菌落數(shù)分別為（286、298、297），（35、32、31），（36、7、2）．
①不適合用于計(jì)數(shù)的為10^-5倍數(shù)的稀釋液，用另外兩組稀釋倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為10^-3時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10^-4組．．
②某同學(xué)認(rèn)為為了防止雜菌的污染，可在培養(yǎng)基中加入青霉素，你覺得該同學(xué)的說法是否確？不正確，理由是青霉素抑制雜菌繁殖的同時(shí)，也會(huì)抑制目的菌的繁殖．．
（3）實(shí)驗(yàn)小組從土壤中篩選出兩株乙草胺降解菌D₁和D₂，溫度對(duì)兩株降解菌的生長(zhǎng)的影響如圖所示．對(duì)溫度適應(yīng)范圍更廣的是菌株D₁，溫度會(huì)影響菌株的生長(zhǎng)狀況的原因是溫度會(huì)影響與菌株生長(zhǎng)代謝有關(guān)酶的活性．

Answer 1

分析 1、兩種純化細(xì)菌的方法的比較

	優(yōu)點(diǎn)	缺點(diǎn)	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離	不能計(jì)數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

2、檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)，可以看出采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)．

解答 解：（1）分析題意可知，實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中獲取乙草胺降解菌，因此需要利用選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基該降解菌，即將土壤樣品置于以乙草胺為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)．
（2）①用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，因此10⁵倍數(shù)的稀釋液不適合用于計(jì)數(shù)；稀釋倍數(shù)為10³時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10⁴組，因此用另外兩組稀釋倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致．
②青霉素抑制雜菌繁殖的同時(shí)，也會(huì)抑制目的菌的繁殖，因此該同學(xué)說法錯(cuò)誤．
（3）分析曲線圖可以看出，對(duì)溫度適應(yīng)范圍更廣的是菌株 D1，溫度會(huì)影響菌株的生長(zhǎng)狀況的原因是溫度會(huì)影響與菌株生長(zhǎng)代謝有關(guān)酶的活性．
故答案為：
（1）乙草胺
（2）①10^-5 稀釋倍數(shù)為10^-3時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為 10^-4 組．
②不正確       青霉素抑制雜菌繁殖的同時(shí)，也會(huì)抑制目的菌的繁殖．
（3）D₁ 溫度會(huì)影響與菌株生長(zhǎng)代謝有關(guān)酶的活性

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；識(shí)記接種微生物常用的兩種方法及注意事項(xiàng)，掌握微生物計(jì)數(shù)的方法，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．