Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物（htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基因與載體用__________切割后，通過(guò)DIVA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用____________技術(shù)。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其____________。采集的精子需要經(jīng)過(guò)____________，才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是_____________。為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行___________。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的______________。

（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到_________，說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。

Answer 1

【答案】 同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交 超數(shù)排卵 獲能(處理) 顯微注射法 性別鑒定 全能性 htPA(或人組織纖溶酶原激活物)

【解析】試題分析：本題結(jié)合轉(zhuǎn)htPA基因母羊的培育過(guò)程圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，解題關(guān)鍵能識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

（1）目的基因和運(yùn)載體需用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割，產(chǎn)生相同的粘性末端，通過(guò)DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術(shù)，原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵。采集的精子需要經(jīng)過(guò)獲能（處理），才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法。為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進(jìn)行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的全能性。

（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。