Question

【題目】血栓主要由不溶性的纖維蛋白等物質(zhì)組成。納豆激酶(NK)是一種在納豆發(fā)酵過程中由納豆菌產(chǎn)生的蛋白酶，它不但能直接作用于纖維蛋白(A過程)，還能間接激活體內(nèi)纖溶酶原(B 過程)。如圖是有關(guān)納豆激酶溶栓機理簡圖，請據(jù)圖回答問題：

【1】人們所需的納豆激酶必需通過分離提純才能獲得，下面是分離提純的步驟，其基本順序是_______________。

①層析提純 ②過濾 ③沉淀 ④破碎細胞 ⑤酶制劑 ⑥冷凍干燥

使酶蛋白沉淀通常采用改變pH或加入_____________。

【2】研究NK直接水解作用：給定纖維蛋白平板，將____________滴加其上，若出現(xiàn)相應(yīng)的溶解圈，則可說明___________________________________________。

【3】NK 的間接作用是通過_____________________________________激活體內(nèi)纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓。

【4】請根據(jù)下列給出的實驗材料，比較NK 與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果，并在表格空白位置上，補全相應(yīng)內(nèi)容。

供選實驗材料：NK溶液、內(nèi)源性纖溶酶溶液、纖維蛋白塊、蛋清溶液，緩沖液、雙縮脲試劑、量筒、試管和秒表。

實驗步驟：（“+”表示添加，“-”表示未添加）

	加入物質(zhì)的成分	試管1	試管2
1	A	+	+
2	緩沖液	+	+
3	納豆激酶（NK）溶液	+	-
4	B	-	+

①表格中A處添加的物質(zhì)是_____________，B處添加的物質(zhì)是____________。

②實驗結(jié)果的鑒定所用的觀察方法是 _________________________________。

Answer 1

【答案】

【1】 ④②③①⑥⑤ 硫酸銨

【2】 納豆激酶（或NK） NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用(NK在體外有溶栓效果)

【3】刺激血管上皮細胞，釋放組織纖溶酶原激活劑

【4】 纖維蛋白塊 內(nèi)源性纖溶酶溶液 觀察記錄蛋白塊消失的時間

【解析】

1、識圖分析可知，圖中納豆激酶(NK)一方面直接作用于纖維蛋白，使纖維蛋白降解，溶解血栓；另一方面納豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮細胞，使血管上皮細胞釋放組織纖溶酶原激活劑激活體內(nèi)纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓。

2、分析題干信息可知，該實驗的目的是比較NK與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果，因此實驗的自變量是酶的種類，因變量是纖維蛋白塊的消失的時間，其他如試驗用的纖維蛋白塊大小、緩沖液的濃度和體積、酶的濃度和體積屬于無關(guān)變量，無關(guān)變量應(yīng)該保持一致。

【1】由題意知，納豆激酶（NK）是由納豆菌產(chǎn)生的蛋白酶，因此納豆激酶分離提純的過程是先破碎細胞釋放納豆激酶，然后經(jīng)過過濾、沉淀，層析提純，再通過冷凍干燥獲得酶制劑，即④②③①⑥⑤；使酶蛋白沉淀的常用方法是改變PH或加入硫酸銨。

【2】分析題圖可知，納豆激酶（NK）能直接作用于纖維蛋白，使纖維蛋白降解；將納豆激酶（或NK）滴加在給定纖維蛋白平板上，可以檢驗納豆激酶（NK）直接降解纖維蛋白的作用，如果現(xiàn)相應(yīng)的溶解圈，說明NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在體外有溶栓效果）。

【3】分析題圖可知，納豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮細胞，使血管上皮細胞釋放組織纖溶酶原激活劑激活體內(nèi)纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓。

【4】①根據(jù)以上分析可知，該實驗的目的是比較NK與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果，實驗的自變量是酶的種類，因變量是纖維蛋白塊的消失的時間，其他如試驗用的纖維蛋白塊大小、緩沖液的濃度和體積、酶的濃度和體積屬于無關(guān)變量，無關(guān)變量應(yīng)該保持一致。因此A處加入的物質(zhì)應(yīng)該是纖維蛋白塊，B加入的物質(zhì)是內(nèi)源性纖溶酶溶液。

②通過比較蛋白塊消失的時間的長短比較NK與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果。

本題以納豆激酶（或NK）的溶解血栓的機理為背景考查學(xué)生的獲取信息的能力以及解決問題的能力，要求學(xué)生能夠正確識圖分析，判斷出納豆激酶（或NK）的溶解血栓的機理的途徑，這是該題考查的重點；同時利用所學(xué)的酶的提純的知識點解決問題，掌握實驗設(shè)計的基本原則，能夠結(jié)合題意正確判斷實驗的目的，找出實驗的自變量、因變量和無關(guān)變量，這是該題第4小題解決的關(guān)鍵。