(12分) 下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。

據(jù)圖回答:

(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用       限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因,篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含        的培養(yǎng)基上進行。

(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是   (填字母代號)。

A.啟動子       B.tetR       C.復制原點      D.a(chǎn)mpR

(3)過程①采用的操作方法是         (填字母代號)。

A.農(nóng)桿菌轉化     B.大腸桿菌轉化   C.顯微注射    D.基因槍法

(4)為檢測人乳鐵蛋白是否表達成功,可采用        (填字母代號)技術。

A.核酸分子雜交    B.基因序列分析   C.抗原-抗體雜交    D.PCR

(5)基因工程的核心步驟是              

 

【答案】

((12分,每空2分) k&s%5u

(1)Hind Ⅲ和BamHⅠ 氨芐青霉素      (2)A (3)C  (4) C 

(5)構建基因表達載體

【解析】由圖示可知:需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因,因酶切后tetR四環(huán)素抗性基因結構被破壞而ampR結構完好,故用含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基可篩選含有重組載體的大腸桿菌。啟動子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識別和結合的位點,可調控基因的特異性表達。過程①表示把重組載體導入受體細胞的過程,當受體細胞為動物細胞時,常采用顯微注射法。過程②表示把早期胚胎移植到代孕母牛子宮的過程,屬于胚胎移植技術。)經(jīng)過程②得到新個體是細胞全能性的體現(xiàn)。人乳鐵蛋白基因是否成功表達,關鍵看是否有其表達產(chǎn)物即人乳鐵蛋白,可用抗原—抗體雜交法檢測該蛋白是否存在。基因工程過程的關鍵步驟是基因表達載體的構建。

 

練習冊系列答案
相關習題

科目:高中生物 來源:2012屆福建省長泰一中高三上學期期中考試生物試卷 題型:綜合題

(本題分兩小題,12分)
第Ⅰ小題(7分)
洋蔥(2n=16)為二倍體植物。為比較不同處理方法對洋蔥根尖細胞分裂指數(shù)(即視野內(nèi)分裂期細胞數(shù)占細胞總數(shù)的百分比)的影響,某研究性學習小組進行了相關實驗,實驗步驟如下:
①將洋蔥的老根去除,經(jīng)水培生根后取出。
②將洋蔥分組同時轉入質量分數(shù)為0.01%、0.1%秋水仙素溶液中,分別培養(yǎng)24 h、36 h、48 h;秋水仙素處理停止后再轉入清水中分別培養(yǎng)0 h、12 h、24 h、36 h。
③剪取根尖,用Carnoy固定液(用3份無水乙醇、1份冰乙酸混勻)固定8 h,然后將根尖浸泡在1 mol/L鹽酸溶液中5~8 min。
④將根尖取出,放入盛有清水的培養(yǎng)皿中漂洗。
⑤用石炭酸—品紅試劑染色。
⑥制片、鏡檢;計數(shù)、拍照。
實驗結果:不同方法處理后的細胞分裂指數(shù)(%)如下表。

秋水仙素溶液處理
清水培養(yǎng)時間/h
質量分數(shù)/%
時間/h
0
12
24
36
0.01
24[來]
10.71
13.68
14.19
14.46
36
9.94
11.99
13.59
13.62
48
7.98
10.06
12.22
11.97
0.1
24
7.74
9.09
11.07
10.86
36
6.12
7.87
9.98
9.81
48
5.97
6.68
7.98
8.56
請分析上述實驗,回答有關問題:
(1)步驟③中“將根尖浸泡在1 mol/L鹽酸溶液中”的作用是__________。
(2)步驟⑥為了獲得相應的觀察視野,鏡檢時正確的操作方法是__________。
(3)根據(jù)所學的知識推測,石炭酸—品紅試劑是一種______性染料。
(4)為了統(tǒng)計數(shù)據(jù)更加科學,計數(shù)時應采取的方法是__________。
(5)根據(jù)上表結果可以得出如下初步結論:
①質量分數(shù)為____        __秋水仙素溶液誘導后的細胞分裂指數(shù)較高;
②本實驗的各種處理中,提高細胞分裂指數(shù)的最佳方法是______。
(6)下面為一位同學在步驟⑥所拍攝的顯微照片,假設細胞a的染色體數(shù)目增加了一倍,最可能原因是                             _ ___________ 

第Ⅱ小題(5分)
原尿中葡萄糖、氨基酸等物質的濃度與血漿中的基本相同。原尿經(jīng)腎小管上皮細胞的選擇性重吸收和分泌作用后形成尿液。正常情況下尿液中不含葡萄糖。腎小管上皮細胞中的葡萄糖通過被動運輸?shù)姆绞竭M入組織液。下圖為腎小管壁及相關結構示意圖。

回答問題:
(1)腎小管上皮細胞中的葡萄糖濃度________(高于、低于、等于)組織液中的。
(2)原尿中的葡萄糖進入腎小管上皮細胞的運輸方式是________,需要________的參與。
(3)腎小管上皮細胞重吸收水分與_____     ___內(nèi)分泌腺密切相關,原尿中葡萄糖未能被完全重吸收從而導致尿量增加的原因是__                     ______。

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