(12分) 下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。
據(jù)圖回答:
(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因,篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進行。
(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是 (填字母代號)。
A.啟動子 B.tetR C.復制原點 D.a(chǎn)mpR
(3)過程①采用的操作方法是 (填字母代號)。
A.農(nóng)桿菌轉化 B.大腸桿菌轉化 C.顯微注射 D.基因槍法
(4)為檢測人乳鐵蛋白是否表達成功,可采用 (填字母代號)技術。
A.核酸分子雜交 B.基因序列分析 C.抗原-抗體雜交 D.PCR
(5)基因工程的核心步驟是
((12分,每空2分) k&s%5u
(1)Hind Ⅲ和BamHⅠ 氨芐青霉素 (2)A (3)C (4) C
(5)構建基因表達載體
【解析】由圖示可知:需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因,因酶切后tetR四環(huán)素抗性基因結構被破壞而ampR結構完好,故用含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基可篩選含有重組載體的大腸桿菌。啟動子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識別和結合的位點,可調控基因的特異性表達。過程①表示把重組載體導入受體細胞的過程,當受體細胞為動物細胞時,常采用顯微注射法。過程②表示把早期胚胎移植到代孕母牛子宮的過程,屬于胚胎移植技術。)經(jīng)過程②得到新個體是細胞全能性的體現(xiàn)。人乳鐵蛋白基因是否成功表達,關鍵看是否有其表達產(chǎn)物即人乳鐵蛋白,可用抗原—抗體雜交法檢測該蛋白是否存在。基因工程過程的關鍵步驟是基因表達載體的構建。
科目:高中生物 來源:2012屆福建省長泰一中高三上學期期中考試生物試卷 題型:綜合題
(本題分兩小題,12分)
第Ⅰ小題(7分)
洋蔥(2n=16)為二倍體植物。為比較不同處理方法對洋蔥根尖細胞分裂指數(shù)(即視野內(nèi)分裂期細胞數(shù)占細胞總數(shù)的百分比)的影響,某研究性學習小組進行了相關實驗,實驗步驟如下:
①將洋蔥的老根去除,經(jīng)水培生根后取出。
②將洋蔥分組同時轉入質量分數(shù)為0.01%、0.1%秋水仙素溶液中,分別培養(yǎng)24 h、36 h、48 h;秋水仙素處理停止后再轉入清水中分別培養(yǎng)0 h、12 h、24 h、36 h。
③剪取根尖,用Carnoy固定液(用3份無水乙醇、1份冰乙酸混勻)固定8 h,然后將根尖浸泡在1 mol/L鹽酸溶液中5~8 min。
④將根尖取出,放入盛有清水的培養(yǎng)皿中漂洗。
⑤用石炭酸—品紅試劑染色。
⑥制片、鏡檢;計數(shù)、拍照。
實驗結果:不同方法處理后的細胞分裂指數(shù)(%)如下表。
秋水仙素溶液處理 | 清水培養(yǎng)時間/h | ||||
質量分數(shù)/% | 時間/h | 0 | 12 | 24 | 36 |
0.01 | 24[來] | 10.71 | 13.68 | 14.19 | 14.46 |
36 | 9.94 | 11.99 | 13.59 | 13.62 | |
48 | 7.98 | 10.06 | 12.22 | 11.97 | |
0.1 | 24 | 7.74 | 9.09 | 11.07 | 10.86 |
36 | 6.12 | 7.87 | 9.98 | 9.81 | |
48 | 5.97 | 6.68 | 7.98 | 8.56 |
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