Question

【題目】普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉入酵母菌中，經篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過程如圖所示）

（1）圖1中,為達到篩選目的,平板內的固體培養(yǎng)基應以 作為唯一碳源。②、③過程需重復幾次,目的是 。

（2）某同學嘗試過程③的操作,其中一個平板經培養(yǎng)后的菌落分布如下圖所示。該同學的接種方法是 ；根據平板菌落分布情況，請分析該同學存在的操作失誤 。通過統(tǒng)計平板上的菌落數，能推測出樣品中大約含有多少活菌，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在 的平板進行計數。用此接種方法統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目 ，原因是 。

（3）以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,工程酵母菌發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是 。

（4）上述工程酵母菌培養(yǎng)過程中，有關操作正確的是 。

A．玻璃刮刀用火焰灼燒進行滅菌

B．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌

C．倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進行

D．獲得的菌種如果需要保存，可置于37℃恒溫保存

Answer 1

【答案】（1）淀粉 篩選出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（2 分）

（2）稀釋涂布平板法 涂布不均勻 30-300 低

當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落 （2 分）

（3）工程酵母菌利用淀粉的速度很快，發(fā)酵產生CO2的速度也很快（其他合理答案也給分）（2 分）

（4）C

【解析】（1）該實驗的目的是獲得利用淀粉的工程酵母菌菌種，所以培養(yǎng)基應該以淀粉為唯一碳源。②、③過程需重復幾次的目的是篩選出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌種。

（2）圖中平板培養(yǎng)后的結果，形成了多個菌落，因此為稀釋涂布平板法，但是菌落分布不均勻，集中分布在一定區(qū)域，說明涂布不均勻。用稀釋涂布平板法進行微生物計數時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數，就能推測出樣品大約含有多少活菌。一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數。用此接種方法統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目低，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落。

（3）工程酵母菌利用淀粉的速度很快，發(fā)酵產生CO2的速度也很快，所以用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,工程酵母菌發(fā)酵罐需要先排氣。

（4）玻璃刮刀用酒精消毒，A錯誤；培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿前進行滅菌，B錯誤；倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進行，以防止雜菌污染，C正確；菌種的保存一般發(fā)生在低溫的環(huán)境中，D錯誤。