Question

【題目】已知細(xì)菌X可以產(chǎn)生脂肪酶，用于生物柴油的生產(chǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）為獲取細(xì)菌X，可從含有油料種子腐爛物的土壤中取樣，用_________（“液體”或“固體”）培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是___________________，以確保能夠從樣品中分離所需微生物。

（2）若要統(tǒng)計(jì)土壤樣品中細(xì)菌X的數(shù)目，宜采用________________法進(jìn)行接種，該接種方法的計(jì)數(shù)結(jié)果往往會(huì)比顯微鏡直接計(jì)數(shù)結(jié)果小，原因是__________。

（3）如果將1ml菌液稀釋100倍，在4個(gè)平板上分別加入0.1ml的上述稀釋液，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為29、32、35、38，據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為_______。

（4）純化獲得的菌種若采取臨時(shí)保藏的方法保存菌種，不能保存很長(zhǎng)時(shí)間，原因是___。

Answer 1

【答案】液體 增大細(xì)菌X的濃度 稀釋涂布平板 該方法只是統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，而且多個(gè)菌體相互靠近時(shí)會(huì)形成一個(gè)菌落，造成計(jì)數(shù)結(jié)果偏小 3.5×107 菌種易被污染或產(chǎn)生變異

【解析】

細(xì)菌X的分離原理： 細(xì)菌X可以產(chǎn)生脂肪酶，能分解脂肪加以利用，故在用脂肪作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)菌X能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。在液體選擇培養(yǎng)的條件下，可以使微生物充分接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使適應(yīng)環(huán)境的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物的作用。接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。每克樣品中的菌株數(shù)（或“每ml樣液中的菌株數(shù)”）＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。臨時(shí)保藏法保存菌種時(shí)，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異，因此這種方法保存的時(shí)間不長(zhǎng)。

（1）為獲取細(xì)菌X，可從含有油料種子腐爛物的土壤中取樣，用液體培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。選擇培養(yǎng)的目的是增大細(xì)菌X的濃度的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物。

（2）若要對(duì)篩選獲得的菌液進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)將菌液用稀釋涂布平板法接種到平板上。該方法只是統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，而且多個(gè)菌體相互靠近時(shí)會(huì)形成一個(gè)菌落，造成計(jì)數(shù)結(jié)果偏小。

（3）如果將1mL菌液稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別加入0.1mL的稀釋液，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，4個(gè)平板的菌落分別是29、32、35、38，據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為 （29+32+35+38）/4×10×1000×100=3.5×107。
（4）采用臨時(shí)保藏法保存菌種時(shí)，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異，因此這種方法保存的時(shí)間不長(zhǎng)。