Question

如圖是將人的生長激素基因?qū)�入細菌B細胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A．已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達，探究：

（1）圖中所示的基因工程操作中目的基因是

 

，受體細胞是

 

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（2）如何將目的基因和質(zhì)粒相結(jié)合形成重組質(zhì)粒（重組DNA分子）？

 

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（3）目前把重組質(zhì)粒導入細菌細胞時，效率還不高；導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質(zhì)粒，有的導入的是普通質(zhì)粒A，只有少數(shù)導入的是重組質(zhì)粒．此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：將得到的細菌涂抹在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的，反之則沒有．使用這種方法鑒別的原因是

 

．
（4）若把通過鑒定證明導入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，會發(fā)生的現(xiàn)象是

 

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（5）導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么？

 

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Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示表示將人的生長激素基因?qū)�入細菌B細胞內(nèi)制造“工程菌”的過程．質(zhì)粒A上含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因，構(gòu)建基因表達載體后，破環(huán)了質(zhì)粒A的四環(huán)素抗性基因，但氨芐青霉素抗性基因正常，所以導入重組質(zhì)�；蚱胀ㄙ|(zhì)粒的大腸桿菌都能抗氨芐青霉素，但導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能抗四環(huán)素．

解答： 解：（1）分析圖示可知，圖中所示的基因工程操作中目的基因是人的生長激素基因，受體細胞是細菌B．
（2）將目的基因和質(zhì)粒相結(jié)合形成重組質(zhì)粒（重組DNA分子）：①用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個有黏性未端的切口；②用同種限制酶切割目的基因，產(chǎn)生相同的黏性未端；③將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的DNA連接酶，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒．
（3）將得到的細菌涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是 導入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒有．使用這種方法鑒別的原因是普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒均含有抗氨芐青霉素基因，其表達產(chǎn)物能分解青霉素．
（4）若把通過鑒定證明導入普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，由于普通質(zhì)粒上有抗四環(huán)素基因，重組質(zhì)粒上的該基因由于目的基因的插入而被破壞，因此培養(yǎng)基中的細菌有的能生長，有的不能生長．
（5）基因成功表達的標志是受體細胞通過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程合成出相應的蛋白質(zhì)，即人的生長激素．
故答案為：
（1）人的生長激素基因     細菌B
（2）①用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個有黏性未端的切口；②用同種限制酶切割目的基因，產(chǎn)生相同的黏性未端；③將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的DNA連接酶，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒
（3）普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒均含有抗氨芐青霉素基因，其表達產(chǎn)物能分解青霉素
（4）有的能生長，有的不能生長
（5）合成人的生長激素

點評：本題結(jié)合“工程菌”的制造過程，考查基因工程的應用，要求考生識記基因工程的基本操作步驟，能分析題圖，明確目的基因插入質(zhì)粒后會破壞質(zhì)粒的四環(huán)素抗性基因，再對選項作出準確的判斷，屬于考綱識記和理解層次的考查．